遗传级联
存在细微的遗传机器,可指导单个合子在复杂的多细胞生物中的生长。每个单元格中整齐的包装是一个预定的程序,这是一组微妙的信号和提示,不仅会影响该单元的命运,而且会影响其后继者及其邻居的命运。这种发育级联反应的结果是对胚胎和生物体进行模样。这是一种形式和功能的模式,被带入成年后并传递到后代。
从受精的时刻,一系列的时间和空间提示可以激活适当的基因,这些基因的产物激活或抑制其他下游成分。该级联在整个开发过程中发展,以精心调节,精心定向和令人惊叹的可预测顺序向前行进[2]。
对发育生物学的研究旨在阐明这些信号,表征它们,并更好地理解单个细胞如何成为复杂的多细胞生物。为此,研究人员经常利用各种荧光标记物标记和识别发育级联中遗传成分的产物。连接生物学和光学领域,通常最好使用共聚焦显微镜查看这些荧光标记[3]。
光谱分离
在开发中正确标记和标记多个基因产品果蝇胚胎通过荧光蛋白表达或荧光标记的免疫标签已经是一项具有挑战性的努力,但仅代表成像挑战的一半。要生成一个发育中的胚胎的完整图,研究人员需要一种能够足够频谱分开不同探针的仪器,并且必须具有足够的光学分辨率来将这些标签定位到适当的结构。
Dianne Duncan博士在圣路易斯华盛顿大学管理生物学成像设施。她的兴趣包括对发展和形成的遗传控制果蝇楷模。直到最近,光学和技术约束仍禁止在4个标记的荧光胚胎中对所有四个通道的正确成像。光谱重叠禁止精确的分离荧光团和扫描速度限制使高分辨率的深Z堆栈繁琐。此外,由于野外均匀性和技术限制的挑战,其他系统上的无缝扫描是不平凡的。
SP8平台的固有光谱性质,再加上快速线序列扫描的能力,可实现完整的果蝇胚胎的出色,高分辨率,高信号到噪声比例的瓷砖扫描所有四种颜色的光谱分离。使用闪电的收购后图像处理拉斯X Navigator帮助在大型合成领域中产生了特别令人惊叹的多通道图像:
莉卡sp- 探测器允许对通道的柔性,纳米计算调整,以实现最佳效率和光谱分离。连续的多通道Beamsplitter(AOBS)在顺序和同时成像中都可以为完美的激发示意。白光激光器(WLL)完成了“白色共聚焦”的概念;它允许用户同时使用多达470和670 nm之间的8个波长的波长或组合来激发。Leica混合探测器(HYDS)的低黑暗噪声产生了“虚拟无噪声图像”,而它们的出色灵敏度允许使用较低激光强度激发,以帮助在长期成像中保持样品稳定性[4]。
用户的声音
“ Leica的光谱探测器使我们能够简单,迅速地获得4通道线,而不会引起串扰的并发症。Leica杂交探测器对生成具有良好信噪比的干净图像具有重要作用。”
美国圣路易斯华盛顿大学成像设施主任Dianne Duncan博士。
参考
- taufliegenbekämpfen -6 HausmittelGegenGärfliegen / Mostfliegen
- Johnston DS和Nüslen-Vollhard C:“果蝇胚胎中的模式和极性的起源。”单元68/2 pp 201-219(1992)
- Borlinghaus RT:“白色共聚焦” Springer International Publishing(2017);DE:“Weiß中的Konfokale Mikroskopie” Springer Spektrum(2016)
- Borlinghaus RT:“哪个传感器最适合共聚焦成像?”,Leica Science Lab