共焦显微镜

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共焦显微镜

徕卡微系统公司的共聚焦显微镜是顶级生物医学研究和材料188金宝搏的&188bet怎么注册#32593;址科学应用表面分析的合作伙伴,在亚细胞结构和动态过程的三维成像和精确检测方面提供了前所未有的精度。

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什么是共焦显微镜?

共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)采用光学切片的方法对样品进行成像。共聚焦成像的好处是通过去除失焦的荧光信号来显著增加对比度。它非常适合于延时成像,荧光寿命成像显微镜(这部电影),光漂白后的荧光恢复(收紧)、Förster共振能量传递(烦恼)和荧光相关光谱学(未来作战系统)测量。

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共焦显微镜的用途是什么?

共聚焦显微镜通常用于亚细胞结构和生物分子的可视化和分析,如蛋白质,在固定和活的标本。你可以从科学实验室(徕卡微系统公司的显微镜知识门户)找到更多关于共聚焦显微镜应用的信息。188金宝搏的网址

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共聚焦显微镜是什么时候发明的?

1957年,马文·明斯基(Marvin Minsky)申请了一项专利,其中首次包含了对工作中的共聚焦显微镜的描述,但它在很大程度上被科学界忽略了。多年来,随着激光技术和探测器的进步,这种方法得到了广泛改进。共聚焦显微镜在20世纪80年代成为一种普遍接受和流行的技术。

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对共焦

共焦激光扫描显微镜(CLSM)是利用光学手段从显微样品中生成切片的一系列方法之一。样品保持完整,切片可以重复多次。真正的共焦扫描(TCS)是一种技术,一次只能照亮和观察一个衍射受限的光斑。共焦成像的好处是通过消除失焦雾,显著提高对比度。光学切片的Z序列(3D图像堆栈)是后续渲染的源,如立体图、深度编码图或3D电影。TCS与多荧光成像,延时成像,这部电影收紧未来作战系统测量-加上整个世界的光谱应用。

常见问题共焦显微镜

受激发射损耗超分辨率显微镜允许在远低于衍射极限的分辨率下纯粹基于物理原理成像受激发射损耗依赖于控制荧光团状态的能力,即发射与暗状态。衍射限制点内荧光团的发射通过叠加适当波长的环形激光束限制在亚衍射区域(受激发射损耗光束)到共聚焦显微镜的激发光束上。这种方法迫使荧光团在受激发射损耗光束在自发发射光子之前返回基态。有效焦体积可以减小到几十nm。欲了解更多信息,请参阅:Nanoscopy满足使用寿命-介绍新的TauSTED

荧光寿命是指一个荧光团在通过发射光子返回基态之前在激发态停留的时间。在一个荧光团种群上测量到的这种发射的特征时间称为荧光寿命,其范围在皮秒到纳秒之间。荧光寿命是一个特定荧光团的特征参数,它可能随其所在环境或构象状态而改变,而与荧光团浓度无关。局部环境因素包括离子浓度、pH值、亲脂性或其他靠近荧光团的分子的存在。这个事实让这部电影理想的功能成像,使研究分子功能和相互作用。此外,这部电影可用于区分发射光谱重叠的荧光团或消除不必要的背景荧光。有关这部电影,请参阅:荧光寿命成像

当在厚试样和样品内部深处成像时,由于可见光散射,使用单光子激发的共焦荧光显微镜可能具有挑战性。单光子激发可实现的最大成像深度约为100µm。相比之下,多光子显微镜利用了单光子激发的多光子由于波长较长而减少散射的红外光。这一事实使多光子显微镜成为厚标本和样本深层组织成像的理想选择。多光子显微镜已用于显示整个大脑的复杂结构以及研究肿瘤的发展、转移和转移生物体中的mune反应。有关更多详细信息,请参阅教程:用于深部组织成像的多光子显微镜原理

光板显微镜,也被称为选择性平面照明显微镜,是一种温和的方式成像敏感样品或快速生物过程的活样品。光学扫描只在一个平面上进行,从垂直方向进行检测。激发是用一个薄的光板来照亮焦平面,使样品免于失焦激发。DLS显微术使用数码相机,有利于活体标本的快速成像。欲了解更多详情,请参阅文章:共焦和数字光片成像

利用生物样品中分子固有振动对比度的显微镜方法。通常有两种方法:一种是相干反斯托克斯拉曼散射(汽车)或受激喇曼散射(SRS)。CRS的最大优点是不需要对样品进行标记,因为图像的对比度来自于样品中存在的各种分子物种的光谱特性。由于没有标签,CRS可以让标本在近乎原始状态下成像。欲了解更多信息,请参考:相干拉曼散射(CRS)显微镜

它是共焦显微镜的最佳光源。白光激光器(WLL)由高能脉冲激光器组成红外-光纤激光器,通过光子晶体光纤馈电以产生光谱连续性。通过声光分束器从该连续介质中选择小波段(国内企业)。WLL在整个光谱范围内提供从蓝色到红色可调的激发。有关更多详细信息,请参阅文章:白光激光器

对于荧光显微镜,它是可取的过滤和分离特定的颜色带的激发和发射的荧光团。过去,滤光片和分束通常是用滤光片、镜子等平面光学元件进行的。它们具有规格固定、交换速度慢的局限性。另一种完全不同的方法是利用声光元件进行激励控制(用AOTF)和激励发射分离(用国内企业.这些声光器件允许灵活的可调性和高速切换。欲了解更多详情,请参阅文章:真共焦光谱显微镜系统中的声光学

生命科学研究

徕卡共聚焦显微镜在亚细胞结构和生物分子的可视化、测量和分析方面具有先进的创新和技术专长,支持生命科学研究界的成像需求。

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活细胞成像

活细胞和标本的成像需要一种“温和的”成像技术,它可以保持生理条件和标本的完整性。徕卡共聚焦显微镜集成了高性能的探测器和摄像机,专门的照明系统拉斯维加斯X成像软件和其他专用组件,使活细胞成像解决方案,满足生命科学家的需求。

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超分辨率

188金宝搏的网址徕卡微系统公司是超分辨率显微镜领域的先驱,与该领域的顶尖科学家密切合作。徕卡微系统提供尖端的受激发射损耗(受激发射损耗)技术集成到其共聚焦平台。

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癌症研究

癌症是一种复杂的异质性疾病,由缺乏生长调节的细胞引起,破坏正常功能,导致细胞生长和增殖失控。徕卡共焦显微镜帮助研究人员从亚细胞和分子水平揭示癌症的机制。

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神经科学

为了更好地了解神经系统,神经科学家经常使用显微镜来研究复杂的标本,这是非常具有挑战性的。188金宝搏的网址徕卡微系统公司提供了广泛的共聚焦显微镜,使神经科学家能够克服这些挑战。

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消息

小鼠胚胎镶嵌图像

高分辨率鼠标胚胎马赛克图像,由722块瓷砖组成,包含1.9亿像素。这部电影数据与四个特征荧光寿命,颜色编码。采集时间:1:23 h分析时间:1:00 h

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