目标标签
188金宝搏的网址Leica Microsystems的目标根据类型编码和标记不同。
编码和标签提供了一个简短而紧凑的概述，用于识别目标和主要光学性能和目标的主要光学性能和应用。
您可以找到有关光学系统的分配的信息，例如：与无限校正光学元件一样“HC”和“∞”。
关于其他指示，请详细说明。
188金宝搏的网址Leica Microsystems HC系统
Leic188金宝搏的网址a Microsystems HC系统（谐波复合系统）包括光学组件已经彼此相匹配以获得最佳图像生成并且参与了光学像差的校正：目标，目镜，管镜头，相机和电视的适配器。
HC. |
目标包括在HC系统中。 |
HCX. |
该目标也与过去的光学相容（Delta Optics 1991-1997） |
HC系统可确保
- 平衡光学和机械配件尺寸，
- 所有光学系统组件的平衡对准，
- 平衡，可靠的技术解决方案，
- 具有渐进式制造技术的高级光学性能。
为了纠正某些光学像差，显微镜被认为是整个系统。
球面像差，彗形像拍，轴向色差最佳地校正，在它们源自的地方，即在特定组分中。
在物镜，管透镜和目镜中并联校正横向色差和散光。
这最佳图像结果因此是通过更正的相互作用．
找到最适合您需求的目标！
目标的放大率
每个目标都标有其放大率，例如5倍或100倍。
然而，单独的目标的放大率不确定显微镜的整体放大率。这是由目镜倍率乘以（用于管透镜1x）的客观放大率。
例子：
40x目标x 10x目镜= 400x整体放大
然而，应该注意，客观放大率越高，可见物体场的越低。
数值孔径
目标的数值孔径（NA或A）是光学图像的关键参数确定目标的解决能力和图像的亮度．
它由它定义半孔径角度的正弦一种镜头和折射率N浸渍介质．
根据该定义，数值孔径越大，焦点越窄，因此较高的分辨能力。
目标标有其放大率，其次是特定的Na值，例如10x / 0.40或63x / 1.40。
可以通过使用来改变目标的数值孔径虹膜隔膜目标。
“数值孔径”一词在莱卡科学实验室的文章中有详细的解释:“注意”空“放大率”
虹膜隔膜
通过使用虹膜隔膜目标，可以改变目标的数值孔径。这对于宽场显微镜特别有用。如果虹膜隔膜闭合，则数值孔径和分辨率降低，但景深增加。如果再次打开虹膜隔膜，则数值孔径增加，分辨率增加，但是景深降低。通过缩小光圈，还可以用作暗场目标。
虹膜隔膜目标标有标有数值孔径可以调节的范围，例如1.4-0.7。
孔径，解析功率和景深之间的物理关系如图所示。小孔径产生低分辨率但大的景深。高光圈意味着更好的分辨率但更少的景深。
纠正衣领
高分辨率目标的表现是最佳的标本和所有中间光学介质的折射率匹配目标的设计值。覆盖夹持厚度和温度的变化以及不均匀的厚试样引入折射率不匹配。这导致点扩散函数，几何失真和色差的恶化。这些效果限制了显微镜图像的渗透深度，对比度和强度。
浸入式油传统上具有折射率，接近标准冠玻璃。浸出物目标是为该油的折射率设计的。当靠近覆盖玻璃或嵌入在介质中的样品靠近沉默的折射率接近浸入浸泡油时，它们是最佳的。为了提供了偏离这一价值特殊目标的折射率的样本．最常见的是水浸物目标和甘油浸泡的目标．有关浸入式介质的更详细描述，请参阅这里．水和甘油浸没目标是对覆盖玻璃的变化非常敏感 - 引入具有折射率不匹配的介质的变化厚度 - 温度，浸渍介质或样品本身的偏差．因此，具有更高NA的水和甘油浸入物体具有a纠正衣领弥补这些差异。
校正套环轴向移动中央镜头组，可用于恢复最佳图像分辨率和亮度。随着矫正领的手动调整需要时间和经验，可以扰乱样品，徕卡提供水浸泡器件采用电动校正项圈．
corr=纠正衣领的目标
后焦面
Leica Microsys188金宝搏的网址tems的目标由固定的后焦点平面定义（见图）。
目标的后焦平面代码用作选择匹配的目标方面的参考DIC.如果需要，棱镜。这具有以下优点：可以使用多个目标DIC.棱镜。
A B C D或E.=目标的后焦平面
超长的工作距离
可到达的样本区域通常受到目标与样本支架、多孔板边缘或其他设备(如电生理学或活体成像)碰撞的限制。具有超长自由工作距离的目标可以不受限制地成像这些样本的边缘。
通过多光子激发或清除组织的深层组织成像还需要大的自由工作距离目标，以完全受益于这些技术的光学优势。这里，对多于一个线轮计的工作距离的需要并不罕见。然而，目标的数值孔径仍然需要尽可能大以提供有意义的高分辨率图像。
188金宝搏的网址Leica Microsystems提供一系列目标，具有极大的自由工作距离，用于干燥或水浸。具有长时间工作距离的水浸泡的目标也具有大的接入角度和惰性陶瓷前部，具有最小的电生理学和热导率。
具有超长自由工作距离的水浸目标:
HCX.apo.l 20x / 1.0 w用m32螺纹用于使用徕卡DM6 FS.和CFS，FWD：2毫米
HCX IRAPO L 25X / 0.95 W，M25螺纹用于所有显微镜，FWD：2.5毫米
HCX.apo.L U-V-I系列，FWD：2.2 - 3.6毫米
L.=目标超长免费工作距离
对比的方法
对比方法可视化相移对人眼不可见，因此能够观察未染色的活样本。
特别适用于特异性对比方法的目的是相应标记的。
BD. |
对于Brightfield / Infident Light Darkfield |
PH值 |
相触对目标 |
rc. |
反射对比目标（仅用DM r） |
P，Pol |
低应变，用于定量极化 |
/ |
不适用于入射光，除荧光外 |
LMC. |
调制对比度目标（仅与Leica DM IRB） |
匹配覆盖夹具
盖玻璃是一种光路的重要组成部分因此，应符合与目标相同的光学质量标准。如果纠正的话，高质量的目标只能提供他们的全部潜力浸入介质还有盖玻璃。
干，水和甘油的目标非常敏感偏离覆盖纤维厚度。与A的目标纠正衣领可用于纠正这些偏差。
- |
用于和没有覆盖物的使用 |
0. |
使用没有覆盖玻璃 |
0.17 |
适用于0.17毫米覆盖物（DIN / ISO） |
1.8问 |
用于加热阶段的1.8毫米石英玻璃窗 |
0 - 2 |
适用于厚度为0 - 2 mm的覆盖物 |
可用标准覆盖夹具厚度是：
第1号 |
0.13mm-0.17mm. |
第1.5号 |
0.16mm-0.19mm. |
1.5h |
0.17mm +/- 0.005mm. |
最佳结果所需的覆盖夹型取决于浸渍介质和数值孔径（NA）。表1可以称为一般规则。
表1：覆盖夹具和浸入液体
| 浸入介质 | 有或没有 覆盖夹克 |
覆盖玻璃类型 1.5 |
覆盖玻璃类型 1.5小时 |
| 空气 | na <0.30 | na <0.70 | na> 0.70 |
| 水 | na <0.60 | na <0.90 | na> 0.90 |
| 浸型G（甘油） | NA < 0.80 | na <1.10 | NA > 1.10 |
| 浸入式n（油） | na <0.90 | na <1.30 | - |
| 浸入F（油） | na <0.90 | na <1.30 | na> 1.30 |
浸入媒体的目标
对于高分辨率，数值孔径（NA）目标需要大于1.这还需要沉积介质，折射率大于1，即除空气之外。常见的浸渍介质是油，水和甘油。必须与某个目标一起使用的浸渍介质在目的上表示。
油 |
DIN/ISO标准浸泡油 |
W. |
水 |
| GLYC. | 甘油 |
imm |
任何其他或多于一个浸入媒体 |
所有光学相关的元件（浸没式介质，覆盖玻璃，样品）在物镜的前透镜前面的前透镜前面具有主要影响图像质量。理想情况下，所有这些光学层的折射率都应匹配目标设计的折射率。实际上，随着样品通常不均匀，覆盖玻璃厚度并不是在图像采集期间的精确变化和温度变化。在为某种应用选择目标和浸渍介质时，必须考虑这些因素。
折射指数一些重要的浸入媒体
培养细胞 |
1.33 - 1.38 |
| 键入f油 | 1.52 |
| 甘油 | 1.45（21°C） - Leica Immersion液体类型G的1.46（37°C） |
| 硅油 | 1.41 |
| 水 | 1.33 |
100% PBS pH 8,9 |
1.34 |
割草 |
1.46 |
| 加拿大加油 | 1.52 |
| 明晰 | 1.45 |
| 巴布 | 1.54 |
| 覆盖夹克 | 1.52 |
物镜的数值孔径越高，并且样品内部感兴趣的结构越深，它更重要地匹配样品的折射率和浸渍介质。不同的折射率导致球形像差和结构的几何扭曲。这导致对比度和定义的丧失，以及出现压缩或拉伸的结构。
所有光学相关的元件（浸没式介质，覆盖玻璃，样品）在物镜的前透镜前面的前透镜前面具有主要影响图像质量。理想情况下，所有这些光学层的折射率都应匹配目标设计的折射率。实际上，随着样品通常不均匀，覆盖玻璃厚度并不是在图像采集期间的精确变化和温度变化。在为某种应用选择目标和浸渍介质时，必须考虑这些因素。
折射指数一些重要的浸入媒体
培养细胞 |
1.33 - 1.38 |
| 键入f油 | 1.52 |
| 甘油 | 1.45（21°C） - Leica Immersion液体类型G的1.46（37°C） |
| 硅油 | 1.41 |
| 水 | 1.33 |
100% PBS pH 8,9 |
1.34 |
割草 |
1.46 |
| 加拿大加油 | 1.52 |
| 覆盖夹克 | 1.52 |
物镜的数值孔径越高，并且样品内部感兴趣的结构越深，它更重要地匹配样品的折射率和浸渍介质。不同的折射率导致球形像差和结构的几何扭曲。这导致对比度和定义的丧失，以及出现压缩或拉伸的结构。
油
Leica Immersion油型和F型的折射率为1.518（在23℃和546nm），即与标准冠玻璃相同（N= 1.518）。对于多色成像，浸入油的分散也很重要。它通常被称为ABBE编号，并应匹配ABBE编号，目标是为否则而设计的，将发生色差。例如，Leica浸入式油型具有42.1的ABBE数，而浸泡油型F具有46的ABBE数，这对于荧光成像是最佳的。类型N不适合荧光成像。
浸没物镜是在符合油折射率的介质中的样品的理想选择，即嵌入树脂，加拿大BALM或甘油 - 明胶中的经典固定标本，或者被成像，或者靠近覆盖物，即小于几μm。如果折射率不匹配，则远离覆盖灯泡的图像亮度和分辨率会很快劣化。
对于活细胞成像，即在水性样品中成像，我们强烈建议使用水或甘油浸没。
具有极高孔径的油浸泡物体仅在相对窄的温度间隔中提供完全光学性能，因为浸入油的折射率大大取决于温度。自由工作距离越大，油层越厚，因此更大的是温度相关像差对图像质量的影响。这种温度效应随着自由工作距离线性而变化，但取决于NA到4的功率。
对于偏离室温的温度的实验，水浸是推荐的，因为水的折射率依赖性显着较低，并且可以补偿，因为许多水浸泡的目标具有校正套环。
水
对于浸渍介质的折射率和样品观察水性介质中的活细胞，水浸泡物体是最佳的，其是比例如浸入油的折射率更近匹配。但是，水在37℃下迅速蒸发。这Leica水浸没微量分配器在运行实验期间自动添加水，以提供稳定的水浸泡。
找到最适合您需求的目标！
清算媒体
三维结构的volumumetric成像，无论是在共聚焦显微镜，MP技术还是灯表成像中，达到了几十μm后可能的限制。其原因在于生物样品的不同结构。例如，水具有1.33的折射率（RI），蛋白质具有高于1.44的RI和甚至高于1.45的脂质，这意味着它们与穿过组织的光的相互作用是不同的。
光线被其他结构散射和吸收，导致大多数组织不透明，这在较大的组织样本和深度成像中尤其明显。为了使这些样本更加透明，使用了不同的结算技术。所有组织清除技术都着眼于“平衡”折射率，以减少光散射的不均匀性，同时不破坏三维结构，也不影响可能存在的荧光色素。
为了达到仍然含有脂质的水合样品的充分清除。通常必须实现超过1.45的RI。同时，目的应具有足够大的工作距离，大视野，以及空间分辨率，高数孔径。多通道多光子成像还需要在蓝色到附近的光谱范围内的高性能IR.．即使在几毫米的深度处右接收所有这些参数的关键是光路长度的控制，即透镜上的校正套环，其允许适应不同的折射率。
此外，一些清算方法使用侵略性介质，例如巴布或肉桂酸乙酯，需要特殊设计的目标。
HC PL Fluotar 5x / 0.15 IMMDLS.
HC Fluotar L 16x / 0.60 Imm CorrDLS.
HC Fluotar L 16x / 0.60 Imm Corr Visir
HCX.apo.L20x / 0.95 IMM
