生物和清除样本的温和和灵活的3D成像

STELLARIS DLS:利用光片显微镜的优势,同时保留共聚焦显微镜的功能

斑马鱼眼部内皮细胞的深度编码。由Basile Gurchenkov提供,IGBMC成像中心,伊尔基尔奇-格拉夫登,法国。Depth_Coding_of_Endothelial_Cells_in_Zebrafish_Eye.jpg

对于生物样本的3D成像,光片显微镜是一种强大和敏感的工具,允许您测量(亚)细胞动态长时间。与此同时,共聚焦显微镜,一种互补技术,通过阻挡失焦光,创造出样品的清晰图像。在您的实验室中结合光片和共聚焦显微镜可以为您的实验带来优点,并为您的标本提供非常有价值的见解。然而,购买和维护多个系统可能是昂贵的,并且为你的实验切换显微镜使你的工作流程复杂化。

现在,STELLARIS Digital LightSheet将共焦系统和光片显微镜结合到一个仪器中,为您提供您所需要的突破性发现和推进您的研究的灵活性。该平台采用了由徕卡微系统公司设计的TwinFlect反射镜,将光片的功率集成到188金宝搏的网址共焦平台中。除了活体生物样本的3D成像,DLS适用于高效采集清除的标本-所有在一个系统。本文解释了光片技术是如何工作的,以及如何将其与共聚焦显微镜相结合,可以彻底改变您的研究,并让您发现更多。

光片成像:基础

研究生物样本可能是复杂的,光学成像方法如光片显微镜可以让你看到更小的细节。无论你是在数小时甚至数天的时间里跟踪发展中的生物体,光片技术都能让你在没有任何明显的荧光信号减弱的情况下,更多地了解你的标本。但是,是什么使光板显微镜如此有效呢?

动力在于照明和检测。光片显微镜在一个平面上照亮你的标本,使你能够成像高灵敏度的样品或快速的生物过程。您的活体标本是3D成像,因为当您移动您的样品通过光片时,自动有光学切片。飞机被摄像机立即捕捉到——正是这种并行采集使得实时样本动态的可视化得以快速实现。

除了灵敏度和速度,光片显微镜处理你的样品与他们需要的照顾,感谢光的限制在一个平面。光片显微镜自动增加你的样品保护:没有失焦激发,这减少了对焦平面的光毒效应。这降低了样品的整体光损伤毒性和漂白。

在共聚焦成像中,照明路径与同一轴上的检测路径共享[1],而在光板显微镜中,照度与检测物镜相互垂直。这两种系统都功能强大:共聚焦显微镜为您提供高分辨率的样本分析,而光片显微镜有助于厚样本的实时成像。现在,由于技术的进步,这两种方法可以结合成一个仪器,结果令人难以置信。

显微镜选项转换您的研究

STELLARIS数码灯板(DLS)是一个平台,可以让您有效地利用光片和共聚焦显微镜的好处。您可以利用光片显微镜对样品的增强优势,同时保持共焦功能。这是由独特的TwinFlect镜像设备实现的,但它是如何工作的呢?

TwinFlect镜面装置将照明的光片以90°角偏转,将您的设备变成一个光片显微镜。通过这个过程,TwinFlect反射镜将照明和探测光束路径整合到每个带有倒置显微镜支架的STELLARIS系统的垂直轴上。此外,目标和TwinFlect镜像都可以很容易地交换,从而更容易地打开实现目标的路径。

视频1:带双曲折的垂直光片的原理。

《星之星》还有更多内容DLS比眼睛看到的要多。除了您的实验之间的轻松过渡,我们还探索了结合光片技术可以带来的进一步好处。

专用光片光学

物镜和TwinFlect反射镜装置构成了该系统的核心DLS系统。优秀的目标可以用于广泛的应用程序,允许您在一个系统中探索不同的维度。该系统甚至可以可视化清除的组织和有机体的结构细节,所以你可以找到你需要的信息。

STELLARIS的DLS系统使您的研究灵活,同时为您提供选择。通过选择不同的照明目标优化的应用需要,您可以塑造光片,以满足您的实验要求。无论是探索您的标本的微妙之处,增加您的视野,或适应成像介质的折射率,您都可以优化您的实验DLS系统增强您的研究潜力。对于您的最佳检测目标,有越来越多的选项可用,如下所示,服务于从活样本到固定和清除样本的应用需求。

客观的

活细胞成像 糖基清除试剂 BAAB清算兼容
氟唑L 25x/0.95 W 是的 没有 没有
7月L 20 x / 0.5 W 是的 没有 没有
氟泰L 16x/0.6 IMM 是的 是的 是的
7月L 10 x / 0.3 是的 是的 没有
5 x / 0.15 IMM 是的 是的 是的

表1:STELLARIS光片显微镜的物镜DLS

简单的样品制备

STELLARISDLS非常容易使用:垂直实验设置意味着您可以保持您熟悉的样品制备方法。例如,可以将标本嵌入标准玻璃底培养皿的琼脂糖中,使其直接接触。这个准备过程中唯一需要考虑的是什么?移除多余的琼脂,为TwinFlect镜子腾出空间,你的实验就可以运行了。

轻松的配置允许您在多定位实验中筛选多个样品。这是由阶段自动化,使您能够在一个单一的实验装置中成像多个标本。多亏了DLS系统,你可以在更短的时间内发现更多。

STELLARISDLS便于样品安装[2].玻璃毛细管作为样品的优良支架,允许使用较低百分比的基质。有两种尺寸的u型玻璃毛细管可供选择,这意味着它们可以适合不同的TwinFlect镜子,为您提供完美的样品定位。为了帮助定位,旋转装置调整观察角度,以提供更好的样品对齐,允许用户选择样品的哪一边进行研究[3].FEP管具有1338的折射率,能够在水环境中成像。

你也可以实现更高效DLS使用徕卡安装框成像[4].该框架可以制备更多的标本,并可以使用潜在的有害试剂,如BABB(苄醇苯甲酸苄酯),扩大了您的实验调查的机会。

完成更多的星星DLS

光片显微镜是一个强大的工具,无论你是成像敏感的标本或快速动态过程。当与TwinFlect镜子集成到共焦系统中时,它为研究人员提供了找到更多答案的潜力。从活样本到固定和清除的标本,星形星DLS为您提供了一种灵活的解决方案,用于生物样品的温和3D成像,方便的样品安装和优越的光学。

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