通过荧光和电子显微镜获得更深入的了解
谷物种子在稳定环境中储存蛋白质的天然能力已被成功地利用为生产具有药用价值的重组蛋白质的平台(3、4、5)．由于这个原因，对蛋白质的不同运输路线的调查已成为几项研究的主题，因为重组蛋白质的最终储存地点以及所遵循的路线对这种产品的最终产量和质量有影响。
的使用荧光而电子显微镜结合对不同体系(单子代和双子代)中产生的重组糖蛋白的聚糖结构的分析，使我们对该课题有了更深入的了解。事实上，我们已经证明了玉米中蛋白质储存液泡的存在[6]我们已经证明了谷物胚乳和双子叶种子中蛋白质运输的关键差异。因此，在谷物胚乳细胞中，蛋白质储存液泡是重组蛋白进入内膜系统的首选目的地，而不携带进一步的靶向信号(7、8)．同样的蛋白质在烟草或拟南芥等双子叶种子中被有效地分泌，反映了谷物胚乳的高度专业化，胚乳是一种濒死的组织，在萌发后无法存活，其唯一目的是存储蛋白质和淀粉[9]．
重组真菌植酸酶在玉米胚乳细胞中的沉积
图1显示了重组真菌植酸酶在玉米胚乳细胞中的沉积。在玉米胚乳中表达了带有信号肽的重组真菌植酸酶。用刀片将处于发育中期的胚乳切片切开，固定在4%的多聚甲醛和0.5%的戊二醛中。
样品经乙醇系列脱水后，浸入并嵌入LRWhite树脂中，在60°C下聚合。用徕卡Ultracut UCT获得半薄片(1µm)，用甲苯胺蓝染色(a)或用于免疫荧光研究(B)。
超薄切片(80 nm)也获得和染色与1%的醋酸铀酰和3%柠檬酸铅在徕卡新兴市场重组植酸酶免疫金定位后AC20。光和免疫荧光照片用a徕卡DM5500．用飞利浦显微镜观察超薄切片新兴市场-400电子显微镜。
见发育中期胚乳细胞中不同的蛋白质储存细胞器:蛋白质储存液泡(箭头)和玉米醇溶蛋白体(箭头)。植酸酶意外地沉积在蛋白质储存液泡中(B，箭头;C, PSV，箭头)以及玉米醇溶蛋白体(C, zb)周围。淀粉粒(s) 10µm (A, B)， 1µm (C)。
参考文献
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