摘要

镜面增强超分辨率显微镜

超越衍射极限的轴向激励约束对下一代超分辨率显微镜的发展至关重要。受刺激排放耗竭(发生的)纳米技术使用甜甜圈束损耗提供横向超分辨率,但其轴向分辨率仍超过500纳米。全内反射荧光显微镜广泛用于单分子定位,但其检测分子的能力仅限于距离细胞附着表面~100 nm的消失场。我们发现,在共聚焦激发时,点扩散函数(PSF)的轴向厚度可以很容易地提高到110 nm,用镜子代替显微镜载玻片。局部电磁场的干扰将共聚焦PSF限制在110 nm的轴向光斑上,这使得所有激光扫描显微镜都能实现轴向超分辨率。轴向切片可以通过波长调制或通过控制镜子和标本之间的间隔来获得。在不增加复杂性的情况下,镜辅助激励约束将轴向分辨率提高了6倍,横向分辨率提高了2倍发生的,它们一起达到了19nm的分辨率,以解决核孔复合体的内缘,并区分120nm病毒丝的内容。使用镜面增强来增加横向分辨率和减少轴向切片厚度的能力发生的在不增加激光功率的情况下对生物标本成像至关重要,生物标本不能耐受高激光功率。

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杨欣,谢辉,阿隆纳斯,刘勇,陈鑫,Santangelo PJ,任强,奚萍,金东:
镜面增强超分辨率显微镜

光:科学与应用(2016)5e16134;doi: 10.1038 / lsa.2016.134

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