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浸渍冷冻低温电子显微镜的悬浮粒子和细胞

浸渍冻结薄水标本是一个重要的技术准备cryo-transmission电镜(低温-TEM),旨在保护脆弱的生物结构,如分子和细胞水化close-to-native可视化环境。成功的实验,必须生产玻璃冰,必须避免表面污染,而且,最重要的是,必须保存结构的自然状态。本协议描述浸渍冻结的生物样品,如纯化蛋白复合物,病毒,脂质体,合成细胞骨架纤维,孤立的细胞器,或小细胞悬浮在水溶液中,使用新的徕卡”新兴市场医生“网格柱塞。它包括一个讨论的问题一般低温-重要性新兴市场,如样本的属性和标本的预处理。它还提供了细节如何充分利用这个工具的特点获得良好的标本和可重复的结果。故障诊断问题特别是全科医生的操作,以及常见的问题在浸渍冻结遇到手动和半自动仪器,是解决。

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Resch GP, Brandstetter M, Konigsmaier L,城市E和Pickl-Herk问:
浸渍冷冻低温电子显微镜的悬浮粒子和细胞

冷泉哈布。Protoc。2011年,doi: 10.1101 / pdb.prot5642

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