抽象的

膜的超分辨率成像的新探针阐明了运输途径

由于没有合适的标记工具,很难确定参与膜回收的细胞器的分子组成。我们在本文中介绍了一个新颖的探针,称为膜结合荧光团 - 半胱氨酸 - 赖氨酸 - 甲磷脂基团(McLing),该基团标记了质膜,并在内吞作用期间被吸收。它在固定和透化后仍附着在膜上,因此可以与免疫染色和超分辨率显微镜结合使用。我们将MCLIN应用于哺乳动物培养的细胞,酵母,细菌,原发性培养神经元,果蝇Melanogaster幼虫神经肌肉连接和哺乳动物组织。麦林使我们能够研究不同运输细胞器的分子组成。我们用它来解决与来自Corti器官的听觉内毛细胞中的突触囊泡回收有关的几个问题,并研究突触囊泡之间的分子差异,这些突触囊泡在培养的神经元中积极或自发回收。我们得出的结论是,麦林可以在广泛的准备工作中对贩运膜进行调查。

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Revelo NH,Kamin D,Truckenbrodt S,Wong AB,Reuter-Jessen K,Reisinger E,Moser T和Rizzoli So:
膜的超分辨率成像的新探针阐明了运输途径

JCB 205(4):591–606(2014);doi:10.1083/jcb.201402066

在过去的二十年中,通过许多技术改进,超分辨率显微镜一直是发展最快的领域之一。但是,开发新的标签工具,探针及其生物应用,主要落后于技术能力。最近,来自卓越群的Silvio O. Rizzoli教授和纳米级显微镜和大脑分子生理学中心(CNMPB)与他的团队一起开发了一种新技术,扩大了超级分析显微镜的好处,以研究生物学问题。该方法有助于了解细胞如何续订,分布和运输其分子和亚细胞成分。

所有细胞都依赖于通过各种途径(分泌,摄取和膜转换)的膜回收。几种类型的细胞细胞器,例如质膜,骨质网,高尔基体,内体和囊泡。然而,很难鉴定相关的蛋白质的蛋白质组成,因为同一细胞器的膜和蛋白质都需要同时抑制。在这里,主要困难伴随着膜探针,因为在现场细胞实验中几乎可以使用的染料仅固定差,并且在抗体染色过程中“丢失”。

因此,第一作者Natalia Revelo的研究团队开发了一个膜探测,克服了这个问题。探针MCLIN(膜结合荧光团 - 半胱氨酸 - 酰胺 - 甲虫组)是短多肽与膜和荧光团耦合的短多肽的组成。

该研究发表在《细胞生物学杂志》上,表明McLing可用于标记质膜,并忠实地跟踪特定细胞器,在细胞培养和组织中,可以与固定和免疫染色结合进行。Mcling探测器的实用性可以针对各种重要的生物模型系统进行特征,并且已经使作者能够在膜回收领域回答长期的问题。此外,McLing成像也可以延伸到不同的过程。例如,可以在体外的结构和分子组织中的结构组织,或在各种细胞的膜上的蛋白质排列,可以轻松地通过MCLIN进行处理。这些努力将通过为任​​何可用的超分辨率技术进行优化的事实来帮助。

更多信息:
CNMPB:http://www.cnmpb.de

Silvio O. Rizzoli博士教授
大学医学中心哥廷根188bet怎么注册
部门神经和感官生理
C/O欧洲神经科学研究所(ENI)
Grisebachstraße5,37077Göttingen
电话+49(0)551 / 39-33630
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