用于病毒复制研究的直立荧光显微镜

病毒可以在几种显微镜技术的帮助下研究。根据放大倍数和决议在显微镜下，可以观察组织水平，细胞水平，或病毒粒子水平(图1)。通常，病毒粒子本身只能通过电子显微镜或超分辨率显微术．在细胞水平上，病毒的观察主要借助于先进技术宽视野荧光或共焦显微镜。在组织中，亮视野显微镜或基本的广角荧光显微镜可以用于病毒研究。但是显微镜技术的分化并不是以严格的方式进行的。

光电数字图像处理工具等计算结算，可以帮助改善背景信号比，减少失焦模糊。相关的对比度增强可以在微观图像中显示额外的信息。

在测序技术、生物信息学和电子显微镜中，Ogando等人通过荧光维罗E6显微镜:细胞生长被SARS-CoV-2感染，用多聚甲醛固定的玻璃盖片。然后，将细胞与事先接触过SARS-CoV的兔子或老鼠的抗血清一起孵卵(图2)。随后，通过检测与Vero E6细胞中SARS-CoV-2结构结合的SARS-CoV-2来源的抗体荧光标记的二次抗体。另外，细胞核用Hoechst染色。荧光成像采用德国B荧光显微镜。

免疫荧光显微镜观察发现SARS-CoV-2感染细胞中多种抗血清(病毒蛋白nsp3、nsp4、nsp5、nsp8、nsp9、nsp13、nsp15、N、这一事实意味着抗SARS-CoV产生的抗血清在SARS-CoV-2感染的细胞中也能导致特有的荧光染色(图3)。虽然nsps在感染细胞的核周区域发现，但N蛋白散布在细胞质中。在高尔基体中检测到M蛋白。

Ogando等人研究的交叉反应抗血清将成为表征SARS-CoV-2复制周期的有用工具。反过来，这个工具使研究人员能够确定复制抑制剂的潜在靶点。

一个相对简单的实验装置——免疫荧光显微镜——就足以得出病毒复制周期的结论。因为在这种方法中，细胞是在盖玻片上生长，并安装在玻片上，所以立式荧光显微镜是一种实用的解决方案。自动化版本的电动舞台结合大视场(FOV)帮助用户快速获得大的概述。如果单快照就足够了，机械阶段是更合理的选择。