选择研究显微镜时需要考虑的因素

对我来说,什么才是合适的研究显微镜?这篇文章给你一个简单的概述,你应该在选择光学研究显微镜的主要特点。

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光学显微镜通常是生命科学研究实验室的中心设备之一。它可以用于各种应用,阐明许多科学问题。因此,该显微镜的结构和特点是至关重要的应用范围,从亮场荧光显微镜到活细胞成像。

本文简要概述了相关显微镜的特点,并总结了在选择研究显微镜时应考虑的关键问题。

你用什么样的标本?

选择研究显微镜时首先要考虑的是你想要探索的标本类型。对于安装在薄载玻片上的固定样品,可以使用直立显微镜。活细胞需要特殊的显微镜特性,因为它们被保存在充满细胞培养基的相对较大的细胞培养容器中。

只有一个倒置的结构,物镜在下面,聚光镜在样品上面,促进了必要的自由空间和所需的接近物镜的样品。同时倒置显微镜对细胞保持良好的可及性,例如添加微操纵器。

此外,活细胞需要一个适当的环境来生存。温度和有限公司2注意力必须保持在一定的水平。一个气候室使用相应的控制器是满足此任务所必需的。


你认为尺寸是什么?

显微镜样品分为三维:长度,宽度和高度。虽然某些标本(例如组织学部分)仅在XY方向上成像,但是还有其他应用要求在Z维度中获取。图像3D卷e.g.生活细胞,建议采用电动目标旋涡手枪,其能够通过焦点逐步引导样品。成像软件应该能够重建用于3D可视化的单个图像。

对于活细胞,您必须添加尺寸时间。在这种情况下,例如系统稳定是另一个关键特征。由于采集过程中温度的变化会对成像系统产生影响,因此必须采取有效的应对措施。如自动调焦自适应焦点控制(亚洲秘书处抵消这些热影响,并始终找到预定义的焦点。

哪种对比方法适合您的样本?

用显微镜观察的大多数细胞,尤其是动物细胞,没有足够的内在对比度来观察细节。研究人员使用对比的方法解决这个问题。然而相衬(PH)和微分干涉对比DIC.)操纵通过样品的光线来增加对比度,你也可以用染色荧光染料免疫荧光)分别使用荧光蛋白

根据显微镜需要特定设备的对比度方法;例如相位对比需要特别目标DIC.利用某些棱镜它们必须转换成光路。为荧光显微镜你需要特别的过滤数据集允许正确的光波长度进入并退出样品。

光源怎么样?

对比度方法的选择也决定了光源。传递传统明菲尔德显微镜的光照射,相位对比度和DIC.能用来执行吗卤素领导照明。荧光显微镜可以使用LED照明或借助, 或者汞金属卤化物灯。

您想要记录或发布您的结果吗?

如果你想给你的标本拍照或做活细胞成像,你需要一个数码相机显微镜相机.特别是在荧光活细胞成像的情况下,建议使用敏感相机来减少可能伤害细胞的激发光量。除了已经确立的CCDEMDDC如今,sCMOS摄像机由于其高量子效率和采集速度而就位。想了解更多关于数码显微镜相机的信息,请阅读《数码相机技术简介》这篇文章。

此外,很大的视野(FOV)有助于更快地找到感兴趣的区域,并在同一时间成像更多的细胞。现代研究用显微镜的特点是19 mm fov在相机端口,完美地匹配19毫米SCMOS相机芯片。

通常,只拍摄标本的图像是不够的分析数据你获得了。为此目的易于使用成像和分析软件帮助获得定量数据和做扎实的数据分析。

你需要厚样品的(3D)信息吗?

厚样品对显微镜来说是一个挑战。特别是在宽场显微镜,当整个样本同时被照亮时,从聚焦区域发出的额外光线会大大降低识别聚焦样本的特征。

计算结算可以帮助获得自从焦点光的图像。该技术可以应用于单个图像平面以进行即时结果(ICC:即时计算清除),或者可以与额外的解卷积步骤(SVCC:小卷计算清算; LVCC:大批量计算清算)组合,以便更好.去卷积将光子信息重新分配给它们的原点,从而在焦平面中提供了有用结构的更好地对比。这可以使用户能够更轻松地将感兴趣的结构与传统的广场图像更容易区分。

你想在显微镜上操纵你的细胞吗?

在过去几年中,标本的照片操纵变得流行。这意味着研究人员不仅观察活细胞,而且在光线的帮助下操纵它们。光漂白后的荧光恢复(收紧)就是一个帮助理清细胞动态过程的例子。对于这类操作技术,通常需要额外的光源,这些光源必须集成到显微镜的光路中。

这种方法并不简单。徕卡无限端口是一个通用的解决方案,耦合额外的光源到显微镜的光路径,而不干扰图像质量做。收紧、光开关、消融或光遗传学。只要手头有合适的适配器,研究人员甚至可以将他们自制的设备连接起来。

你的预算是多少?

一个重要的问题是你能花多少钱。一些显微镜供应商提供预定义的配置,适合特殊应用。但是,如果您不需要付费购买的所有预配置组件怎么办?这就是为什么自由配置组件可以比购买预定义的显微镜系统便宜。

此外,对显微镜的要求可能随时间而改变。在这种情况下,可升级系统具有一定的优势。使用预定义的和固定的配置,您会发现自己只能使用有限数量的应用程序。可升级性给你自由成长与不断变化的需求。

考虑到这些要点,一个模块化的显微镜平台, 如那个徕卡DMi8,使研究人员能够以经济实惠的显微镜系统从后来升级并随着他的需求增长。

谁会使用显微镜?

显微镜用户的范围可以是非常不均匀的。特别是在大学用户可以是非常经验或绝对的初学者。因此,易于使用的显微镜​​系统由一个直观的软件,如徕卡应用套件X (Las X.),有助于让人们快速开始并迅速获取数据。例如,工作流面向设计,图像分析向导以及外围设备的无缝集成系统简化了您的工作。

除了广角研究显微镜,立体显微镜也经常用于生命科学研究实验室。请在文章中找到更多信息"选择立体声显微镜时需要考虑的因素“。

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