故事

枫(糖槭)叶-高压冷冻和冷冻替代瞬变电磁法

应用说明徕卡EM HPM100 -生命科学研究

将叶子浸泡在十六烯中,并置于温和的(0.3巴)真空下10分钟,以排出内部空气空间。然后,将叶片修整成适合载体的形状,放置在6mm a型标本载体的200 μm一侧。用额外的十六烯填充空余空间,然后将6mm的B型标本载体平放于顶部。这个大会是高压冷冻徕卡EM HPM100

冷冻标本冻结代替温度为-85°C徕卡EM AFS通过两个阶段的过程:在0.2%戊二醛和1%单宁酸丙酮中浸泡3天,然后在1%四氧化锇和0.1%乙酸铀酰丙酮中浸泡2天。在加热到室温超过18小时后,他们被嵌入了Spurr树脂。块分段用徕卡60nm的超微仪。使用LaB6源进行分析TEM

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结果
如果内部空气空间充满了十六烷,用HPM100可以很容易地在6毫米载体中制备大块叶子。用单宁酸和锇的两步取代过程有助于保存和对比膜。内质网、高尔基体和液泡膜在这种制剂中特别明显。叶绿体保存得很好,提取很少,这反映在致密的基质中,尤其是淀粉颗粒周围的基质中。这导致类囊体与化学固定样品相反。

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