介绍Ultramicrotomy

超微切开术主要作为透射电镜样品制备方法(TEM）.它允许样品内部的精细结构在纳米尺度的分辨率被可视化和分析。它生产超薄切片的样品在一个快速和干净的方式。超微切开术的一个关键优势是切片内电子透明区域的大小和均匀性以及切片产生的速度。

超显微切开术可用于多种类型的样品，包括生物样品和工业材料，如聚合物(橡胶和塑料)和韧性、硬或脆的材料(金属或陶瓷)。还有其他技术可以制备这些样品的薄片，如聚焦离子束(撒小谎)铣削、离子蚀刻、三脚架抛光和电化学处理，但超微切开术在速度和清洁度方面有优势。

阵列层析成像(AT)是一种用于细胞和蛋白质结构分析的高分辨率三维图像重建方法。使用扫描电子显微镜(扫描电镜)或光学显微镜检查(LM)超薄树脂包埋连续切片的有序排列成像。AT允许对细胞和蛋白质结构进行定量、体积结构分析和可视化。它比传统的共聚焦显微镜具有更好的横向和空间分辨率。此外，通过部分自动化的生物标本检查可以实现更高的吞吐量。

为TEM对于阵列层析成像的最佳3D重建，超薄有序的切片是先决条件。一个超微切片机，比如EM UC7来自徕卡微188金宝搏的网址系统公司(Leica Microsystems)的一项技术可以生产这种超薄的样品切片(20到150纳米厚)。

为了在透射电子显微镜中形成样品的图像，电子必须穿透样品而没有任何速度上的重大损失。样品对电子辐射的渗透性部分取决于它的质量和厚度(厚度×密度)，部分取决于电子显微镜的加速电压。被样品吸收的电子会引起热量的积聚，从而在物体中形成伪影。

当用超微切片机切片时，样品被插入一个安装在特殊轴承上的手臂，该手臂执行电动垂直切割运动。在断面被切割和试件臂缩回后，一个极其精确的机电进给装置将试件略微向前移动一个与所需断面厚度相对应的设定距离。切片是通过在固定的玻璃或钻石刀的锋利刀片上垂直移动标本来完成的。直接从刀刃上取下这些切片很困难，因为它们太薄了。因此，它们是在切片过程后从水浴表面收集的(或在冷冻切片的情况下借助微操作器)。在进行电子显微镜检查之前，可以做任何可能需要的进一步准备(新兴市场）.

为AT制备软生物标本需要几个步骤。这些步骤包括:

• 组织固定
• 标本提取和树脂包埋
• 连续切片和切片带收集，形成切片阵列
• 如有需要，对切片进行染色成像。

然后对剖面阵列进行成像扫描电镜或LM(通常荧光)。然后，将阵列中的切片图像合并在一起进行三维图像重建和分析。

由于使用了大量的超微切片机，AT样品的制备有几个耗时且繁琐的手工步骤。一种先进的超微切片仪，如ARTOS 3 d徕卡微系统公司的超微切片机可以通过自动化188金宝搏的网址标本切片和最小化对齐切片所需的时间来加快制备过程扫描电镜或LM成像。

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