为什么植物解剖吗?
植物像人类和动物一样由不同种类的组织组成,这些组织在农业和营养等许多领域都具有科学意义。例如植物的根,植物的叶子,花和树木的木材。根据背后的问题,有必要识别植物组织的特定亚结构,并分离这个亚结构,以获得其分子含量的清晰图像。
在研讨会期间,客户对自己的徕卡独自解剖了不同类型的根,叶子,花朵和草LMD.系统后简要介绍。这个过程非常简单和快速,因为没有特殊的标本制备,也不需要任何昂贵的消耗品。
的LMD.这个过程可以与手术刀切割叶片相比,但尺寸要小得多(µm范围)。用激光刀切割后,解剖体简单地滴入收集容器(如PCR管帽),并准备进行下游分析(如PCR、qPCR、质谱等)。
为激光显微解剖准备部分植物
为了改善叶子或类似强组织的平整度,可以将标本置于两个之间帧的幻灯片(称为“帧三明治”)允许快速导航,几乎不需要重新聚焦。对于这样的“框架三明治”,只使用框架载玻片是至关重要的,玻璃载玻片在这样厚而硬的样品上也会压平样品,但这将导致LIGE(激光诱导玻璃蚀刻)的高风险:高激光功率可能划伤玻璃,从而使其极其难以切割,因为激光功率被(蚀刻)玻璃吸收。由于这个原因,框架载玻片被推荐用于高激光功率应用(植物,包括木材,骨骼,牙齿等)。
用里面的荧光蠕虫准备植物根
在植物的叶子旁边有些植物的根荧光蠕虫里面的一些研讨会与会者的兴趣。在这个特殊的任务中,首先固定在两个滑动框之间的根和激光设置被调整,以允许切割通过整个根。然而,在整个根内的荧光蠕虫的鉴定是不可能的。为了用冷冻刀实现根部的平坦切割,程序如下:
- 首先,一些10月(最佳切削温度化合物)上的样品在-35℃冷冻机中冷冻。
- 将线性划痕施用于冷冻10月用无菌针。
- 进入每个划痕,一个根纵向放置。
- 划痕中的对齐根被覆盖着10月放回冷冻机-35°C 30分钟。
- 冷冻机设为-20°C,制备10月将对齐的根阻塞,使其平衡45分钟。
- 准备的10月将根排列的块切成35µm的切片,并将含根组织的切片固定在其上PPS钢框架滑块.
- 切片短暂浸入丙酮(-20°C保存)中固定。
- 在荧光模式下,用徕卡(Leica)检测根切片LMD.系统。