LMD的标本设备
玻璃膜幻灯片
对于激光显微解剖，安装在载玻片上的特殊薄膜可获得最高质量的结果。玻片用高膜覆盖紫外线吸收，使他们特别适合冷光烧蚀(蒸发)，被称为玻璃膜载玻片。这类幻灯片如图1a左边所示。
施加到玻璃载玻片的上表面，膜在其边缘处粘在玻璃上。因此，在空气在膜和玻璃骨架之间产生固定样品的矩形区域。膜专门涂层，以确保标本的最佳粘附性。
总的来说，玻璃膜载玻片在膜辅助激光显微切割方面具有广泛的应用潜力(LMD）并配备各种涂层，用于不同的应用。
小心处理箔是必要的，以避免破坏薄膜。应避免玻璃和膜之间的水分积累，因为这可能导致夹层粘在玻璃主干上。玻璃片有两种不同的膜类型:
- PPS(聚苯硫醚)
- 笔(聚乙烯细丝网)
图1a - 1c分别显示了一个用于电机级、扫描级或ITK LMT350超级的标准试样支架，并放置了不同的载片。图1显示了玻璃载玻片(左)、框架载玻片(中)和Ibidi®载玻片(右)。
PEN、PPS玻片
(幻灯片尺寸:26 × 76毫米，可用面积为LMD19 x 41 mm）
标准幻灯片有笔膜。这些可以用于大多数LMD例如，植物研究中使用的极高激光能量外的应用。笔膜有两种不同的厚度：2.0μm或4μm。4μm是与徕卡结合的特殊发明LMD系统:膜比2µm标准更强，允许更容易的切片安装，在安装过程中膜损伤的风险更低，膜本身更重，因此更容易通过重力收集。
笔膜幻灯片也可以在经过认证的RNASE和DNASE的版本中提供，以保证无污染的工作DNA和RNA.研究。与笔膜载玻片一样，PPS涂覆的膜载玻片也可用于几乎所有激光辅助的微散射技术。PPS膜载玻片的自发性荧光较少，比用笔膜的载玻片更少，但比笔滑动到与Xallol的化学处理较小。使用玻璃载玻片时，重要的是将它们放入样品架中，使组织向下。否则，将解释所需的区域，但在膜和捕获装置之间的玻璃袋上掉落，而不是在收集容器本身中捕获。
大的PEN和PPS幻灯片
(幻灯片尺寸:52 × 76毫米，可用面积LMD39 x 45 mm）
这些是用于特别大的标本的PEN或PPS膜玻片，例如神经科学中的组织切片(cf。艾伦琼斯的视频）。特殊的标本持有者可用于微放松。在图2A和2B中可以看出大型玻璃载玻片。
框架幻灯片
(幻灯片尺寸:26 × 76毫米，可用面积为LMD16 x 45 mm）
框架载玻片包括可用各种膜覆盖的金属框架（图4B）。以下薄膜可用于此类载玻片：
- 笔(聚乙烯细丝网)
- PPS(聚苯硫醚)
- PET（聚对苯二甲酸乙二醇酯）
- Pol（涤纶）
- 氟(fluocarbon)
结合特殊的150x干物镜(图3)，无需浸入油就能提供亚细胞分辨率，框架载玻片非常适合单细胞和染色体应用。由于框架载玻片的解剖体直接粘附在箔上，特别适用于极小样本的解剖，如染色体的解剖。带有凸起表面结构的框架支撑，正好适合于框架载玻片前面的空腔，便于将组织切片安装到膜上。这样就形成了一个平坦的表面并支撑着薄膜。在样品制备过程中，通过提供足够的阻力和张力将样品施加到膜上，框架支撑形成了膜的主干(图4)。
然而，框架载玻片可以用于安装组织切片，即使没有框架支持。
与适当涂覆的玻璃膜载玻片一样，具有PPS膜的框架滑块实际上可以使用。
带POL膜的框载玻片主要用于染色体解剖(Post等，MolEcoNotes, 2006)，结合150x干物镜，带PET膜的框载玻片非常适合后续的质谱分析技术(Drummond等。Acta Neuropathol 2017)。PET与其他可用的膜相反，几乎没有软化剂，可以用HPLC纯化蛋白质。这些软化剂可能会阻塞质谱的一部分，因此在阻塞的光谱区域不能观察到一些波段。在用于采集的PCR管中也可以观察到类似的现象。
特殊的Fluo膜特别适用于荧光，pH和真实DIC.。
框架幻灯片也可用作活细胞培养的样品载体。因此，载玻片的矩形腔用作培养皿。建议将幻灯片放入较大的培养皿中的培养，并在将细胞电池电镀到腔中的膜上完全覆盖介质。如果使用笔膜，则培养细胞的形态不会改变，由于不同膜的不同表面性质，其他膜类型可能导致培养细胞的不同形貌。
对于难以附着在薄膜上的样品，可以制作一个夹有两帧载玻片的三明治:简单地将样品夹在两帧薄膜之间，激光就足以切割这种三明治堆。液滴或涂片准备也很容易应用于带框架载玻片的激光显微解剖。
对于植物应用以及其他硬组织，如骨，牙齿等框架载玻片。由于比玻璃载玻片的高激光功率更好地兼容。高激光动力可以边缘玻璃，使材料安装在它上，更难以切割。
为植物如叶子的样品根本不需要叶片，因为这种材料可以直接应用于激光微粉（Hölscher，Rec Adv Polyphenol Res（2019））。
LMD采集设备
帽/微型离心机管
解剖后LMD例如，标准薄壁微离心管及其盖。不同载玻片与帽的组合是激光显微解剖中最常见的应用之一。大多数情况下，使用标准0.2 ml和0.5 ml管，或带一个空(干)帽或带一个装满合适的缓冲液或类似的合适介质的帽。例如，带有RNase抑制剂的溶液可以防止激光显微切割过程后核酸立即分解。同样，蛋白质可以在缓冲溶液中保持稳定状态。空的、干燥的盖帽提供了一种鉴别解剖的好方法，可以很容易地通过前后拍照进行比较。基本上，显微解剖可以转移到任何标准的螺帽上。图5a和5b显示了螺帽和微型离心管的匹配收集器。虽然可以使用特殊的OptiCaps(#11505169)，但对于徕卡激光显微解剖来说，这些都不是必需的。OptiCaps有一个集成的光学元件，以确保最佳的照明均匀性，也可能是“粘合剂”。然而，徕卡不需要使用昂贵的非标准管帽LMD系统作为收集过程是重力驱动的，不需要克服重力。
此外，有1.5毫升管，含有硅胶填充帽。借助LMT350超级的多收集器中的杠杆的帮助，可以使该填充盖与膜上的组织接触。188金宝搏的网址此设置有助于收集挑战性粘性标本。
还有可能收集到特殊的样本装置中，例如PCT微管，用于通过压力循环技术进行组织均质化，蛋白质提取和消化（PCT，Flyerfbiosciences Inc.）。直接收集到这些设备可节省时间，因为不需要重新移液。
8孔条带的通用支架，8孔＆12阱条盖和多孔幻灯片，如18孔IBIDI载玻片或LOC（芯片上的实验室）载玻片
不同的收集设备安装在同一载体的通用支架是独特的徕卡，并提供了多种不同的收集设备的选择，适合不同的应用。此外，万能支架的高度可调，以调整所选的收集器接近标本载体的最小下降距离。
8孔条带可用于大容量应用(例如，活细胞收集到培养基中)，8孔条带帽是高通量应用的理想选择。此外，该万能支架适用于携带腔体载玻片、多孔载玻片以及LOC(芯片上的实验室)设备，如Ibidi®载玻片。所有装置均可作为激光显微解剖的采集装置。
8孔条LCC
开发了这些收集器，以获得对解剖活细胞的后续检查的更高样本产量，并且可以连接在一起以形成96孔托盘。图6A和6B各自示出了具有8孔条LCC的合适支架，其可以连接以形成阱托盘。井托盘是对细胞培养物进行高通量筛选的基础。
使用这种筛选技术，可以分析巨大量的单细胞培养物，如果需要，如果需要，在极短的时间内被重用。
8井和12孔条帽
（用于分子生物学/ PCR）
0.2ml 8孔条带的帽可用作激光微粉的收集器。在激光微粉术之后，8阱条带盖可以放置在0.2ml 8孔条或96孔PCR板上，用于直接插入PCR机器（可根据要求提供）。已经证明了8帽条的使用是可用于随后的PCR，定量PCR或其他加热或冷却过程的理想选择，特别是对于大量样品。
可调高度的48孔收集器（图8）允许在一段时间内使用六个8孔条，使得在一个实验期间具有最小努力，可以容易地填充96孔板。
通用支架也可以用于其他LOC设备，例如用于活细胞培养的18孔Ibidi®载玻片和腔载玻片(图9)。任何自制的载玻片x-y尺寸的收集装置也可以与该支架结合使用。
LCC模式下使用的消耗品
有多种标本载体与LCC的激光解剖，操纵和选择技术相容（活细胞培养）。徕卡提供LMD活细胞治疗专用耗材:
- 培养皿（有或没有笔膜）
- Ibidi®幻灯片（有或没有笔膜）
这些带PEN膜的消耗品可以作为解剖标本的载体，也可以作为活细胞激光操作的标本载体，甚至不带PEN膜的消耗品也可以作为再培养、克隆或下游分析的收集容器。
框架载玻片的矩形腔也可用于细胞培养（见上文→框架载玻片）。
此外，培养皿以及带PEN膜的Ibidi®载玻片可以与常用的收集器(0.5 ml管、0.2 ml管、8孔条、8孔管帽、Ibidi载玻片、常规培养皿、多腔培养载玻片和96孔板)结合。
培养皿
培养皿通常适用于活细胞培养（LCC），可在有或没有笔膜中获得。图10B示出了用于大笔/ PPS载玻片和培养皿的图2A和2B中已经示出的样本支架;插入带笔膜的培养皿代替大幻灯片。图10c显示了培养皿作为收集器的用途。
没有笔膜的培养皿
（Ø50mm）
使用没有PEN膜的传统培养皿来收集和恢复解剖标本。没有PEN膜的培养皿不能用于激光显微解剖标本架，只能用于活细胞操作实验。控件可以对选定区域进行操作LMD使用时间流逝电影功能在长时间观察激光和观察。
用笔膜的培养皿
（Ø50毫米，可用区域LMDØ30毫米）
在有PEN膜的培养皿中培养的细胞可以通过LCC模式进行解剖，转移到其他的培养皿(有或没有PEN膜)或其他合适的收集容器中。膜可以被涂上聚l -赖氨酸或胶原蛋白，以更好地粘附和细胞生长。
Ibidi®幻灯片
（滑动尺寸：26 x 76 mm，每孔适用30μl液体）
这些载玻片配备了专门为活细胞的激光微粉专门设计的孔。每个幻灯片具有18个凹槽，带笔膜底座。
Ibidi®玻片可以与适用于LCC模式的所有集电极组合。
另一个无污染的选择变型是所谓的滑动堆叠（图11B，11C），其由夹心技术彼此顶部布置的2个IBIDI载玻片组成。从这种堆叠中解剖的细胞通过直接的重力落入下一个下部IBIDI载玻片中，该载玻片固定在特殊堆叠支架中（图11B，11C）。随后的再生能力以及提取的细胞的下游分析。
配套的盖子提供了进一步的污染保护选择。
IBIDI®幻灯片也可以用作集合设备与通用支架组合为LOC设备（图11C）。
96孔板
也有一个实验的解决方案，要求更高的吞吐量。96孔标准PCR板(半有裙边，无裙边，或全有裙边)使用户可以同时收集多达96个不同实验的材料。这些板可以直接装入标准PCR机。此外，还有用于活细胞的96孔板支架，例如用于克隆目的。
还有一个收集者选项可以直接解剖到公司制造的特殊96孔板188金宝搏怎么注册Covaris®用于超声波。
