改进肿瘤细胞的药物遗传学分析
来自比萨大学实验外科病理学的外科病区的Niccola Funel博士研究胰腺导管腺癌（PDAC），他的研究的一个主要焦点是确定新的技术来适应适当的治疗：
“PDAC是一种侵袭性很强的胰腺肿瘤，PDAC患者的总体生存率非常低。PDAC组织表现出强烈的结缔组织增生反应，可以掩盖真实的肿瘤表达。然而，药物的靶点是上皮细胞而不是基质细胞(结缔组织增生反应)。我们已经证明，激光显微解剖改进了PDAC的药物遗传学分析，因为它帮助病理学家只采集肿瘤细胞，从而建立它们的真实基因表达。我们比较LMD组织与非LMD最后，利用激光显微切割技术，我们发现，在mRNA和miRNA表达方面存在显著差异方法论的方法，提高分子测试的效率。”
了解不对称干细胞分裂
日内瓦大学遗传医学与发展系的莫妮卡·杰得教授使用LMD对于不对称细胞分裂的研究，允许在发育和干细胞更新期间产生细胞多样性：
“细胞极性的建立和有丝分裂纺锤体的定位是不对称细胞分裂的必要先决条件。虽然已经确定了这些过程中的许多参与者，但现在的大挑战是理解它们如何相互调节以及它们如何调节极性和纺锤体的定位。
我的实验室用线虫胚胎作为模型系统。这是一个研究不对称细胞分裂的伟大系统，因为单细胞胚胎是极化的，第一次分裂是不对称的。此外，我们可以结合遗传学、活细胞成像、生物化学和基因组学/蛋白质组学。
胚胎的一个限制是蛋壳，它不允许使用抑制剂。为了克服这个问题，我们使用LMD. 它通过产生小孔使溶解在胚胎安装培养基中的药物渗透，从而以高空间和时间分辨率抑制感兴趣的通路或蛋白质，从而使坚硬和不透水的蛋壳渗透。
我们也使用LMD用于机械破坏其他结构，如中心体和微管，可测量野生型和突变背景下的运动和速度。该系统还用于在发育过程中切除特定细胞，以研究细胞功能和/或谱系。”
Morbus Parkinson之谜
Falk Schlaudraff博士在乌尔姆大学的应用生理学研究所的分子神经生理学研究小组的监督下，在分子水平上研究了帕金森的分子水平。
“关于这种疾病的起源有几种理论。帕金森可以被比作一个谜题。我们已经找到了许多碎片，并可以将其中一些拼凑在一起，但我们不知道整个画面是什么样子的。我们希望有选择性地观察中脑多巴胺能神经元参与发病过程，并使用激光显微解剖在单细胞水平进行验证比较。这项技术可以在不接触或污染的情况下，精确地从复杂组织中切割出单个多巴胺能神经元，并分析单个细胞中的基因表达。188金宝搏的网址
大脑中最普遍的组织类型是支持组织:如果没有激光显微解剖，几乎不可能在分子水平上清楚地描述相对罕见的神经细胞的特征;它们无法与背景噪音区分开来。的单细胞分析经常
导致与完整组织检查所得结果不同。研究表明，帕金森病患者组织中某些microrna的表达发生了改变。我们确认了整个组织的结果。然而，我们也同时检测了微解剖细胞。在这里，我们发现所研究的microRNA表达在单个细胞水平上没有改变。这种组织伪影是在激光显微解剖的帮助下发现的。”
拟南芥的分子网络
米兰大学生物学系的Lucia Colombo教授和Raffaella Battaglia博士的研究旨在了解控制植物繁殖的分子机制。实验室使用拟南芥作为模式物种。从这种小型模式物种获得的分子信息通常是突出重要农艺物种（如水稻）分子网络的基础：
“我们想要识别并在功能上描述那些在拟南芥女性器官形成和受精过程中发挥作用的基因。本实验室对了解胚珠分化基础的分子机制作出了重要贡献。我们参与了这些基因的鉴定和功能鉴定，这些基因主要编码转录因子，为胚珠分化过程的启动提供重要信号。
MADS-box转录因子是一组重要的关键调控因子，它们作为分子开关激活分子级联，导致成熟器官的形成。尽管MADS-box蛋白在植物器官识别和开花时间调控等方面的重要作用已被证实，但目前在植物中尚未发现MADS-box转录因子的直接靶基因。利用激光显微解剖技术，我们发现了首个由MADS-box转录因子调控的胚珠分化基因。
我们知道哪些基因由于MADS盒因子缺乏活性而被关闭。我们已经鉴定并在功能上描述了VERDANDI（VDD）基因作为胚珠识别MADS盒因子的直接靶点，但在雌配子体分化中也起着基础性作用。将单细胞分析与全基因组方法相结合的可能性正在给发育生物学带来强大的推动力。”
图4：激光显微切割有助于识别在雌性器官形成和受精过程中起作用的基因并对其进行功能表征拟南芥．
衰老的线粒体假说
为什么我们会变老？多年来，科学家一直在寻找这个问题的答案——特别是在Morbus Parkinson等老年人神经退行性疾病增加的背景下。医学博士。来自慕尼黑大学神经医院的席罗哈恩（Andreas Bender）正在研究衰老的线粒体假说，认为氧化损伤和线粒体DNA突变是恶性神经功能障碍的一个原因：
“我们的目的是在单细胞水平上研究为什么某些细胞类型比其他细胞更容易患上神经退行性疾病，如Morbus Parkinson。通过激光显微切割从人类死后脑组织中提取这些细胞后，我们对其进行分子生物学检查。特别是，我们正在寻找对线粒体的损伤。”线粒体DNA（mtDNA）。迄今为止，线粒体尚未通过单细胞分析进行彻底研究，尽管越来越多的证据表明，线粒体可能在神经退行性疾病和衰老过程中发挥重要作用。
令我们惊讶的是，60-70岁的对照组患者中也存在大量线粒体DNA突变，尽管明显少于帕金森组。因此，在第二步中，我们检查了从几个月到100岁的所有年龄段的对照样本。我们发现线粒体DNA缺失随年龄增长而增加。我们出生时没有或很少有缺失，在我们生命的某个阶段，突变达到了50%到60%的临界阈值。
激光显微解剖发挥着极其重要的作用，因为单个细胞的精确解剖确保了我们真正检查感兴趣的细胞。在激光显微解剖时代之前，大多数检查是在匀浆上进行的。它们包含不同类型的细胞，所以我们研究的分子连接有时会在巨大的背景噪音中消失。如果一种疾病只影响一种特定的细胞类型，比如帕金森氏症，我们只有在能够分析同质细胞材料时才能获得有意义的结果。”
使用激光显微切割的最新出版物
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