2016年8月12日故事

酵母玻璃体切片(CEMOVIS)的低温电镜观察

徕卡EM HPM100应用笔记-生命科学研究

协议
这些切片是酵母冻与一个徕卡HPM100在铜管高压冷冻系统中，将细胞浆与pH为6.5的MES/葡聚糖缓冲液混合，最终得到MES浓度为50mM，葡聚糖浓度为20%。

样本分段在一个徕卡EM UC7/EM FC7-140°C下带微操作器的超微切片，切片厚度设置为50nm。切片附着在琼脂蕾丝网格上。

作者

¹伦敦大学晶体学系，伯克贝克

主题和标签

EM样品制备

切片使用Tecnai Polara 300KeV (FEI, The Netherlands)显微镜与4K Gatan进行成像CCD相机。切片的放大倍数为23K，层析成像的离焦为-6um，投影图像的离焦为-8um，衍射的相机长度为930mm。面板A中的图像是用IMOD软件包(Kremer等，1996)重建的中央10个切片的平均值，IMOD软件包是使用FEI软件收集的断层图的图像处理软件。