故事

革兰氏阴性热调虫酵母酸盐菌的细胞包络结构,菌株HV2 / 2及其与黄铁矿的相互作用

Leica EM AFS2 - 生命科学研究的应用笔记

样品制备:中等嗜热酸酐的细胞Sp.Strain HV2 / 2,以20,0009xg离心,然后通过高压冷冻在金载体上(徕卡em pact2.,L188金宝搏的网址eica Microsystems GmbH,维也纳,奥地利)。在自动冻结替代装置中进行冻结样品的冻结徕卡em afs2.(188金宝搏的网址Leica Microsystems GmbH,维也纳,奥地利)根据标准方案(9小时在-90°C; 8小时,在-60°C; 8小时,在-30°C)。使用了两种取代溶液:94.6%乙醇加5.4%H 2 O,含有0.5%谷氨酸,1%甲醛和0.5%乙酸铀酰,或丙酮,含有2%OSO 4和0.25%乙酸铀酰酯。最后,在0℃下在纯冰冷丙酮中在0℃下洗涤样品,在室温下逐渐嵌入EPON中并在60℃下固化72小时。使用超微族切割标称厚度为约50-70nm的段(徕卡EM UC6,L188金宝搏的网址eica Microsystems GmbH,维也纳,奥地利)与钻石刀。

它们被收集在未涂覆的铜网格(400平方网)上,并与乙酸2%乙酸铀和柠檬酸铅形成对比。透射电子显微镜(TEM)在飞利浦CM12(FEI Co.,EINDHOVEN,NL)上,在120keV下用LAB6阴极进行。记录显微照片以慢扫描CCD.相机(软件Emmenu 4; TVIPS GmbH,Gautiing,德国)

有关详细信息,请参阅:
Klingl A,Moissl-Eichinger C,Wanner G,Zweck J,Huber H,Thomm M,Rachel R.酸酐毒素菌株SP5 / 1的表面蛋白分析及新的硫铁矿氧化酸酐分离物分离物HV2 / 2,及其可能参与硫铁矿氧化。拱微生物。2011年12月; 193(12):867-82。DOI:10.1007 / s00203-011-0720-y

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图1:EPON嵌入细胞的超薄部分,在黄铁矿微晶上生长。用含戊二醛,甲醛和乙酸铀酰乙醇进行乙醇进行冻取。(a)酸酐sp。HV2 / 2。(b)(a)中所选区域的更高放大率。PY:黄铁矿,C:细胞质;CM:细胞质膜;PP:PELIMPRAMASAMS与肽聚糖;OM:外膜;SL:S层; arrow heads: pili. .Bars: 200 nm (A) and 100 nm (B).

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