用于癌症研究的激光显微解剖
激光显微解剖用于更集中的癌症研究和突变分析。由于一些肿瘤需要高纯度来揭示其潜在突变的秘密,一种专门的工具被重新创造出来,用于提取微量的纯肿瘤组织——不污染任何健康细胞——以进行无偏和无误的下游突变分析:激光捕获。这项技术发展迅速,同时征服了许多不同的国家应用程序从病理学开始,将健康细胞从疾病影响的细胞中分离出来,再到神经科学、发育研究或法医研究等。
在巴西,在徕卡期间LMD系列工作坊由联邦大学Paraná/UFPR和核能农业中心(CENA),肿瘤学和病理学研究。
作为一个准备练习,一些热情的顾客准备了LMD膜的幻灯片不同种类的肿瘤样本被带到工作室,用徕卡对肿瘤材料进行解剖和收集LMD系统。这是最高的纪律立式徕卡LMD系统由产品经理Dr. Falk Schlaudraff演示,随后成功申请,并由与会人员带来相应的样品(图1,2)。
肿瘤解剖是特别有趣的LMD可作为纯肿瘤材料用于突变分析。某些类型的癌症需要高纯度的下游分析,否则,真正的潜在突变可能被周围细胞的健康DNA信号掩盖,这些细胞到目前为止还没有受到肿瘤的影响。与徕卡LMD系统可以观察到载玻片上的肿瘤组织,可以选择纯肿瘤材料并解剖用于下游分析,以确保起始材料100%纯,没有任何与健康细胞交叉污染的风险(图3,4)。
此外,一些肿瘤是异质性的:肿瘤的亚区可能有不同的突变。再次徕卡LMD该系统可以针对不同的肿瘤区域,将其收集到不同的收集血管中,从而获得同一肿瘤的单个亚区域的清晰图像。小的转移灶可以被解剖,为下游分析提供纯的肿瘤组织,而没有激光显微解剖几乎是不可能的。
激光显微解剖的he & e染色
各种肿瘤切片最常见的染色方案是H&E(苏木精和伊红)。染色过程很简单:
- 将玻片浸入蒸馏水中30秒
- 将载玻片浸入苏木精1分钟
- 将滑梯浸入水中30秒
- 将玻片浸入显蓝试剂中,孵育30秒
- 将玻片浸入伊红溶液中,孵育10秒
- 将幻灯片浸入70%的乙醇中30秒
- 将幻灯片浸入95%的乙醇中30秒
- 将幻灯片浸入100%乙醇中30秒
- 在室温下风干玻片
各种应用程序在肿瘤学和癌症研究已经发表在过去的15年里,强调了这项技术在病理研究和精确分子诊断中的重要性。使用的方便性徕卡LMD系统从早期到现在已经有了很大的改进,任何用户都可以在简单的介绍之后操作系统。不到5次点击,甚至直接使用触摸屏进行实时活体解剖都是目前最先进的技术,可以在最短的时间内提取任何大小和形状的肿瘤区域。
*第一台激光显微解剖系统是1976年发明的这项惊人技术的商业重要性和成功都远远超过了它,直到千禧年前后才被重新建立。