荧光寿命作为纳米环境探针
荧光寿命是每一种荧光染料的特征参数,随其微环境或构象状态的变化而变化。寿命信息探测分子环境的组成,如离子浓度,pH值,亲脂性或与其他分子的结合。
结合寿命测量和成像
这部电影将寿命测量与成像相结合:在像素级获得的寿命以彩色编码产生图像。因此这部电影提供有关荧光分子空间分布的信息以及其纳米环境的信息。这样可以获得额外的信息维度。
FLIM数据采集与分析原理
- 重复测量每个像素处激光脉冲与荧光光子之间的时间。
- 激光脉冲到达后光子计数直方图的计算。
- 拟合指数衰减到每个直方图。振幅反映光子总数,时间常数τ称为荧光寿命。
- 使用假色查找表显示生命周期图像。