Leica EM HPM100的扁平标本系统
该系统是最常用的,并且它存在于两个变型:3 mm载体和6 mm载体的平面样本系统。它适用于利用不同培养的细胞类型,细菌,藻类,动物组织的冻结的应用阵列。在扁平标本载体中冷冻的样品通常在冻结装置和树脂嵌入的树脂中进一步加工。
冷冻样品需要仔细选择冷冻保护剂/填料,并且在冷冻之前具体处理,以确保样品的最佳生理状态,以及正确的处理,从样品中可以变化到样品。我们不会详细说明这些细节,但我们必须强调其重要性,并强烈建议对该主题的进一步读数。
填充运营商时的简单规则:
- 避免过度填充或填充载体,因为它会导致冻结结果不佳。
- 避免样品的机械损坏,同时填充载体,因为这将导致次优质
- 始终尝试找到样本大小和载波尺寸之间的最佳相关性。
- 时间是必不可少的。应将样品的操纵减少到可能的最小值。
Leica EM HPM100的管系统
管系统适用于悬浮液中的样品,但主要用于CEMOVIS应用(冷冻玻璃体的电子显微镜检查)。该方法允许研究完全水合的样品和最小,接近无分子聚集。因此,当涉及在原生状态下解析分子结构时,它是首选的方法。对于该特定应用,将样品与葡聚糖混合至刚冻结之前20%的最终浓度。
一旦冷冻样品,可以修剪样品(铜容易被金刚石刀修剪,而不会诱导任何损坏)并在Cryo-UltramicOrotome中切开。有关详细信息,请参阅“简要介绍高压冻结”。
填充管时的简单规则:
- 避免陷入困境的气泡,因为这会损害冻结结果
- 避免在冷冻之前保持样品 - 葡聚糖混合物过长,因为这将导致干燥伪影并将影响样品的生理状态。
蓝宝石系统6 mm for Leica EM HPM100
蓝宝石光盘适用于对粘附单层或用于的研究克莱姆(相关光和电子显微镜)应用。蓝宝石具有优异的热性能,非常方便光学显微镜观测或光刺激应用。
填充管时的简单规则:
- 避免在组装两个蓝宝石时被捕获的气泡,因为这会损害冻结结果,并且可能导致蓝宝石破碎。
- 在冷冻之前,避免将准备的蓝宝石样本 - 蓝宝石装配保持在冻结之前,这会影响样品的生理状态。
- 确保载流子的蓝宝石以适当的方式标记(例如用图案涂覆的碳),因此可以在冻结后和进一步加工期间轻松区分
承认
我们感谢美国犹他大学Shigeki Watanabe博士为他对视频的贡献。