使用标准荧光蛋白的相关性含树脂超分辨率和电子显微镜

我们介绍一种用于相关的树脂超分辨率荧光和电子显微镜的方法（em.）哺乳动物培养细胞中的生物结构。冷冻固定树脂嵌入式样品提供卓越的结构保存，进行树脂的超级分辨率仍然是一个挑战。我们确定了高压冷冻，冷冻替换和树脂嵌入的样品制备方法的关键方面，这对于保留荧光和标准荧光蛋白的荧光和光切换至关重要，例如MGFP，Mvenus和MRUBY2。这使我们能够将单个分子定位显微镜结合在冷冻固定树脂嵌入细胞中标准荧光蛋白的透射电子显微镜成像结合。我们在荧光图像中实现了40-50nm（〜17nm平均单分子定位精度的结构分辨率，而不使用化学固定或特殊荧光团。使用该方法使荧光标记的结构与纳米水平的相同电池中的超微结构相关，以及优异的结构保存。