Brechbühl J, Luyet G, Moine F, Rodriguez I, Broillet M-C:
小鼠犁鼻急性组织切片制备中信息素的成像传感
J. Vis. Exp. 58: e3311 (2011);doi: 10.3791/3311
彼得·卡尔森和马丁Lüscher在1959年首次使用费洛蒙这个词来描述用于物种内部交流的化学物质。信息素是一种挥发性或非挥发性的短命分子,分泌和/或包含在生物液体中,如尿液,一种已知的信息素的主要来源液体。信息素的交流涉及到动物的多种主要形式,如亲族互动、等级组织和性互动,因此直接关系到特定物种的生存。在小鼠中,检测信息素的能力主要是由犁鼻器(VNO)介导的,这是一个位于鼻腔底部的成对结构,被软骨包膜包裹。每个VNO都有一个管状的形状,允许与外部的化学世界接触。188金宝搏的网址感觉神经上皮主要由犁鼻双极感觉神经元组成。每个VSN向腔内延伸一个单一的树突,在腔内末端形成一个大的树突球形,其中包含多达100个化学检测涉及的微绒毛。vns存在许多亚群体。它们是由它们表达的化学受体区分的,因此可能是由它们识别的配体区分的。两个主要的犁鼻受体家族,V1Rs和V2Rs,分别由240和120个成员组成,并在不同的神经上皮层表达。 Olfactory receptors (ORs) and formyl peptide receptors (FPRs) are also expressed in VSNs.
这些神经元亚群是否使用相同的下游信号通路来感知信息素还不清楚。尽管成熟神经元微绒毛中钙通透通道(TRPC2)发挥了主要作用,但人们已经提出TRPC2独立的转导通道。由于VNO中神经元亚群的数量和器官的特殊形态,其信号分子的药理和生理研究是复杂的。
在这里,我们提出了一个小鼠VNO的急性组织切片准备进行钙成像调查。这种生理学方法允许在活体组织的自然环境中,观察先前加载了Fura-2AM钙染料的vns的一般或个别亚群。这种方法也便于研究任何绿色荧光蛋白-标记的信息素受体,适用于其他荧光钙探针的使用。以VG小鼠为例,信息素V1rb2受体的翻译与绿色荧光蛋白通过多顺反子策略。
图像:来自Brechbühl J等人:小鼠梨鼻急性组织切片制备中的图像信息素传感,图2。
J. Vis. Exp. 58: e3311 (2011);doi: 10.3791/3311
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