源自自相关曲线的定量参数
移动颗粒产生强度波动。其自相关的揭示了分子尺度的信息:相关曲线的幅度显示粒子数。拐点处的时间包含有关颗粒移动性的信息。最后,曲线的陡度和形状反映了扩散的类型。颗粒浓度,颗粒质量,粘度和结合级分可以衍生自这些参数。
FCS数据采集与分析的原则
- 在一个兴趣点(梁停放)在激发体积中激发荧光颗粒的激光照射。共聚焦体积的颗粒运动导致强度波动。
- 使用单光子计数模式中的检测器注册强度波动。
- 相关函数的计算。
- 将相应的生物物理模型拟合到相关曲线。获得感兴趣的参数:
- 颗粒浓度
- 扩散系数
- 粘度
- 分子量
- 绑定常数
- 照片物理属性