介绍
Systemic Lupus红斑(SLU)是一种自身免疫性疾病,影响美国约有150万人。导致各种器官的慢性炎症导致永久性器官损害。当SH感染肾脏的肾小球时,称为狼疮肾炎(LN),肾脏中的小血管变得发炎,导致潜在的肾功能衰竭。了解LN中的疾病形成途径对于治疗这种自身免疫疾病的有效疗法将是重要的[1,2]。已经表明,具有钾通道行为的特征缺陷的人T淋巴细胞有助于SLE T淋巴细胞的多动[2]。因此,可以针对新疗法靶向离子通道以抑制SLE患者的过度活性T淋巴细胞,重点关注其趋化性和细胞毒性能力[1,2]。
挑战
对于对肾标本的研究,需要一种成像解决方案,以便在高放大率下快速筛选大型标本概述。宽场,基于相机的荧光显微镜,提供易用性,速度和检测灵敏度,但是,当成像厚度的3D样本图像对比度降低并且由于焦点外模(雾度)而模糊了结构细节[3]。通过检测到的荧光信号产生该雾度,该荧光信号在样本中的焦点间隙[3]。
方法
福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)LN患者的肾组织活检标本用于本研究。在成像之前,将FFPE样品用α-Fluor-647-缀合的兔抗人CD8抗体(绿色)和Alexa-Fluor-594-缀合的小鼠抗CD45RO抗体(洋红色)染色,以标记血管淋巴细胞,a白细胞型[4]。标本中的核用DAPI(蓝色)染色。标本成像在雷霆成像仪3D细胞文化使用大卷计算清算(LVCC)[3]。
结果
检查肾脏标本是否用于记忆T淋巴细胞浸润。图1中的图像显示了检测到洋红色的T细胞渗透的程度。LVCC处理后的雷声图像比原始宽ffield图像更清晰,更清晰。这些结果表明雷霆成像者可以揭示使用传统宽ffield显微镜的成像时在“雾霾”中通常模糊的生物事件。
参考
- M. Khodoun,A.A.Chimote,F.Z.伊利亚斯,H.J.Duncan,H.Moncrieffe,K.Shashi Kant,L. Concorti,T.3的kv1.3频道的靶向敲低校正与系统性红斑狼疮相关的疾病表现,科学推进(2020)Vol。6,不。47,EABD1471,DOI:10.1126 / SCIADV.ABD1471。
- S.A.Nicolaou,P.Szigligeti,L. Neumeier,S. Molleran Lee,H.J.Duncan,S.K.康德,A.B.Mongey,A.H.Filipovich,L. Conforti,Systemicallupus红斑狼疮免疫突触中的KV1.3沟道舱位化的改变动态。(2007)卷。179,ISS。1,PP。346-56,DOI:10.4049 / Jimmunol.179.1.346。
- J. Schumacher,L. Bertrand,Thunder Technology注意:雷霆成像者:他们如何真正工作?,科学实验室(2019)Leica Microsystems。188金宝搏的网址
- R. Warrington,W.Watson,H.L.Kim,F. Romana Antonetti,Immunogy和免疫病理学,过敏,哮喘和临床免疫学(2011)Vol。7,提供。1,DOI:10.1186 / 1710-1492-7-S1-S1。