介绍
挑战
对于表达荧光蛋白的转基因脂肪组织,由于大背景和高度弯曲的表面,通常难以使用宽视场、基于相机的荧光显微镜对脂肪组织的整体样本进行成像(3、4).
对圆形和厚的全套组织标本的研究需要一种成像解决方案,该解决方案允许在大面积上快速筛选,但也允许以良好的对比度获得整个曲面的清晰图像。宽视野显微镜具有易用性、速度和检测灵敏度。然而,圆形厚试样的成像通常产生仅显示清晰焦点表面部分的图像,以及由于从试样内离焦平面发射的检测荧光信号而出现的“雾”。
方法
表达红色荧光蛋白(RFP)的转基因小鼠脂肪组织的厚标本用显微镜成像THUNDER成像仪模型生物,这是一个荧光立体显微镜平台,配备了徕卡微系统公司开发的光数字计算清除技术。188金宝搏的网址采用大体积计算清理(LVCC)方法对图像进行清理[5].此外,利用扩展景深(Extended Depth of Field, EDoF)将z堆图像组合成一个单一的图像,显示曲面上所有聚焦对象。
结果
脂肪(脂肪)组织的图像如下图1所示,其中原始宽视场图像(1A)与THUNDER图像(1B)进行了比较。在THUNDER图像中,脂肪组织的细胞(脂肪细胞)在整个视野中被看得更清楚,背景更少。LVCC使用户能够获得一个清晰的视图的细节,甚至在一个完整的样本,在没有失焦模糊的实时。THUNDER成像仪提供的标本图像比传统的宽视场显微镜更清晰、更清晰。
结论
一个THUNDER成像仪模型生物使用大容量计算清理(LVCC)[5]能够在大面积高度弯曲的脂肪组织标本上产生清晰的图像,也能清除焦外模糊或薄雾。在用于三维图像重建的z堆栈中,脂肪细胞的对比度更高,细节更清晰。
工具书类
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