案例研究

研究脂肪组织的发育和扩张

整座脂肪标本的清晰成像

本文讨论了厚而圆(未切片)的全脂肪组织标本的清晰、高对比度成像雷声成像仪使用计算结算。脂肪组织对新陈代谢的调节非常重要。肥胖以及与之相关的健康问题(如糖尿病和心脏病)的增加,导致了更多关于脂肪组织发育和扩张的研究。荧光显微镜常用来观察脂肪组织。然而,当成像3D,整个安装标本,特定的挑战,如减少图像背景和聚焦大,高度弯曲的表面,应该克服。

作者

主题和标签

介绍

脂肪组织是能量平衡调节的重要组织,起着代谢传感器的作用[1,2].它控制能量的储存和利用以及食物的摄入[1,2].肥胖和相关慢性疾病(如癌症、糖尿病和心脏病)的显著增加促使代谢研究人员更深入地研究与肥胖相关的控制脂肪组织发育和扩张的分子和发育机制[1,2]. 脂肪组织需要神经支配来调节代谢功能[3].然而,关于神经支配的许多信息仍是未知的,部分原因是无法正确地观察这些组织中的神经类型[3].通常使用荧光显微镜对脂肪组织进行研究,但在检查未切片的整个堆积脂肪标本时,可能会出现一些挑战(3、4). 显微镜的最新进展为三维脂肪组织标本的成像注入了活力(3、4)

挑战

对于表达荧光蛋白的转基因脂肪组织,由于大背景和高度弯曲的表面,通常难以使用宽视场、基于相机的荧光显微镜对脂肪组织的整体样本进行成像(3、4)

对圆形和厚的全套组织标本的研究需要一种成像解决方案,该解决方案允许在大面积上快速筛选,但也允许以良好的对比度获得整个曲面的清晰图像。宽视野显微镜具有易用性、速度和检测灵敏度。然而,圆形厚试样的成像通常产生仅显示清晰焦点表面部分的图像,以及由于从试样内离焦平面发射的检测荧光信号而出现的“雾”。

方法

表达红色荧光蛋白(RFP)的转基因小鼠脂肪组织的厚标本用显微镜成像THUNDER成像仪模型生物,这是一个荧光立体显微镜平台,配备了徕卡微系统公司开发的光数字计算清除技术。188金宝搏的网址采用大体积计算清理(LVCC)方法对图像进行清理[5].此外,利用扩展景深(Extended Depth of Field, EDoF)将z堆图像组合成一个单一的图像,显示曲面上所有聚焦对象。

结果

脂肪(脂肪)组织的图像如下图1所示,其中原始宽视场图像(1A)与THUNDER图像(1B)进行了比较。在THUNDER图像中,脂肪组织的细胞(脂肪细胞)在整个视野中被看得更清楚,背景更少。LVCC使用户能够获得一个清晰的视图的细节,甚至在一个完整的样本,在没有失焦模糊的实时。THUNDER成像仪提供的标本图像比传统的宽视场显微镜更清晰、更清晰。

结论

一个THUNDER成像仪模型生物使用大容量计算清理(LVCC)[5]能够在大面积高度弯曲的脂肪组织标本上产生清晰的图像,也能清除焦外模糊或薄雾。在用于三维图像重建的z堆栈中,脂肪细胞的对比度更高,细节更清晰。

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