摘要

同时测量活细胞标准图像的图像特征和分辨率

可靠的解释和定量的细胞特征在荧光显微镜需要准确的估计显微镜分辨率。这通常是通过测量点状物体(如荧光珠)的非生物代理的图像来获得的。虽然适用于共聚焦显微镜,但基于珠粒的测量对于受激发射耗尽显微镜和类似技术来说是有问题的,这些技术的分辨率严重依赖于荧光团和采集参数的选择。在这篇文章中,我们证明了对于已知的几何结构(如小管),通过拟合一个同时考虑点扩散函数(PSF)和荧光团分布的模型,可以原位测量分辨率。

主题和标签

为了解决小管直径与PSF宽度之间的耦合问题,我们开发了一种嵌套环集成PSF拟合技术。这种方法能够在固定细胞和活细胞图像中提取细胞特征的大小和PSF宽度,而不依赖于珠子或预校准。巢环系综PSF拟合精确地再现了来自刺激发射耗竭图像的微管直径,并可以测量COS-7活细胞的内质网管直径。我们的算法已经实现为PYthon显微镜环境的一个插件,免费和开源软件。

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Barentine AES, Schroeder LK, Graff M, Baddeley D & Bewersdorf J:

同时测量活细胞标准图像的图像特征和分辨率

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