寿命 - 适当的替代品

荧光过程提供了用于成像的两个参数：强度和荧光寿命。荧光寿命指定时间，分子保持在激发状态。荧光染料的典型寿命可以通过观察激发排放事件的足够大的整体来测量。我们可以测量图像中所有像素的典型生命周期，并将这些数字写入数组元素。这是荧光寿命成像[1]（fl，也称为τ映射）。典型的荧光寿命范围为0.2至20纳秒。

荧光寿命与荧光素的浓度无关。样品结构是否稀疏地装饰着荧光染料或大量装载：寿命信号总是相同的并且表示在相同环境中存在相同的荧光染料。因此，荧光寿命不受漂白的影响。当在样本深处录制时，图像将比表面图像较暗，但寿命完全不会改变。这是终身测量的主要好处。

如果分子环境导致激发态衰减而不发光光子，则荧光强度降低（淬火）。淬火是发射的单独路径，从而与荧光过程竞争。兴奋状态的储存器现在可以衰减多个过程，因此荧光寿命缩短。寿命中的这种改变可用于收集分子环境的信息。

一种特殊类型的淬火是对邻近的，不同的荧光染料的令人兴奋的能量的非接种转移：“Förster共振能量转移”[2]那烦恼。这里不仅第一荧光染料（供体）变暗和较短的寿命，而且还开始发出第二种荧光染料（受体）在“错误”激发颜色上。由于这种效果需要两种荧光染料（小于10nm）的紧密接触，因此188金宝搏的网址用作研究分子相互作用的“分子尺”。它也是许多现代的基础烦恼- 为衡量生活样品中的各种细胞内参数量身定制：Ca2 +或其他离子浓度跟踪，pH，极性和潜在测量，蛋白质 - 蛋白质相互作用等等。

188金宝搏的网址徕卡微系统呈现出一个新的fl解决所有这些问题的显微镜：SP8 Falcon（用于快速寿命对比）。

该系统基于混合检测器（Hyds）[4]，理想的传感器，用于终身成像，具有非常短的死宿。两个激光脉冲系和发射光子脉冲都立即以高采样速率数字化，并且测量的距离直接进入数据池中。这些到达时间用于输出“快速”fl“ 图像。

新方法允许使用大多数激光脉冲和待应用的滤波器，该滤波器仅利用一个发射的一个光子仅限制脉冲事件。可以通过智能数学方法来校正在第一光子之后非常不久的光子的不可避免的光子抽象。所有这些因素总结到更快的图像录制速度最高10倍。

所有猎鹰fl成像集成在共聚焦显微镜中。记录fl就像额外的频道的激活一样。3D，时间和光谱系列的多维采集模式立即可用fl成像。一个例子是标题 - 图像：具有经典组织学染色的小鼠胚胎。使用Navigator软件，使用722个瓷砖创建了一个图形艺术品，每个瓦片512x512像素。原始图像有190百万像素。寿命配有四个指数，寿命编码颜色。

Leica Microsystems的SP8 Falcon（快速寿命对比）共聚焦和多光子显微镜汇集了所有这些新技术和概念188金宝搏的网址fl解决方案适用于多个应用领域的解决方案。图像采集比古典TCSPC快10倍，迄今为止终身成像中的金标。这使得在使用寿命对比度的情况下开辟了生活样本中的动力学和动力学的可能性。

直接实现和自动化可缓解研究人员从耗时的硬件调整和数据评估。类似于3D堆叠，时间流逝序列，马赛克扫描和激发或发射波长扫描的复杂数据采集模式无缝地结合起来fl。