肾脏下层结构的改变可揭示肾脏病理
肾小球滤过屏障中的足细胞层在肾脏疾病中起着中心作用。足细胞结构的改变与肾功能衰竭的发生有关。因此，高分辨率成像这一层的能力是识别健康和不健康组织的关键。
足细胞层的大小要求成像技术的分辨率远远低于衍射极限。这已被典型地解决与电子显微镜技术，要求复杂的样品制备协议和三维信息缺失。
3 d发生的深度纳米技术为肾脏研究打开了一扇新的大门。3D组合发生的用徕卡做纳米镜TCSSP8发生的3X和光学清晰度可以在光学显微镜下以前所未有的三维细节成像肾脏，并具有蛋白质特异性。
采用3D STED深纳米镜观察肾小球滤过屏障的超微结构
在组织内超过150µm的深处，样品的超微结构特征在新材料的作用下得到了揭示发生的白色甘油物镜。这不仅是在23℃下实现的，也是在37℃活细胞成像条件下实现的，舒适的工作距离为300µm。
忘记物理分区的麻烦吧。享受光谱自由，并跟上不断增长的荧光生物标记调色板。
站在临床研究的前沿。
3D STED深度纳米镜工作流程
清除肾脏样本
Nanoscopy与TCSSP8发生的系统配备了HC PL7月93X/1.30 GLYC马达corr发生的WHITE目标使深入了解健康和病变组织的超微结构。
1.样品制备
第一步是解剖肾脏并在水凝胶的帮助下稳定其结构和生物分子含量。因此，将其置于基于丙烯酰胺的凝胶中，在4°C下孵育，以允许凝胶渗透到组织中。聚合时，温度调到37°C。
2.切片
在水凝胶中稳定后，用振动刀将肾脏切成500µm厚的薄片。
3.清算
光学清晰度有助于使厚的生物样本透明，因此可以进行深度成像。此外，清除增加了抗体穿透深度和染色质量。为了最佳结果的清除，将肾脏切片转移到清除溶液中，并在50°C下孵育数天。
4.荧光Immunolabeling
标准的免疫标记协议提供良好的信噪比在清除样本。一、二抗体孵育一整天，以便有效渗透到厚样本。
5.越来越多的
光散射是由于穿透介质中折射率的不匹配引起的。因此，在安装步骤中，必须考虑样品的RI和安装介质。固定组织的RI约为1.45，水的RI为1.33，果糖溶液与固定组织的RI相匹配。因此，样品被安装在果糖中以匹配折射率，使成像具有高穿透深度。
6.Nanoscopy
样品已经准备好成像TCSSP8发生的3 x。肾小球滤过屏障的高分辨率和深度三维超微结构。用HC PL7月93X/1.30 GLYC马达corr发生的目的:纳米扫描100µm以上是可能的。
7.可视化
显示您的3 d发生的结果与拉斯维加斯X 3D可视化工具-简单直观。
其他研究领域
- 神经科学
- 病理
- 肾疾病
- Glomerulopathies
- 临床研究
- 病理学研究
- 医药研究
进一步的阅读
布鲁姆等。,化学。牧师,2017。受激发射耗尽显微镜。
反等。,科学。代表,2016。三维电子显微镜显示肾小球屏障损伤的演变。
Unnersjo-Jess et al。《肾脏国际》，2015:光学清除肾组织中狭缝隔膜蛋白的超分辨率受激发射耗竭成像
