Cryo电子断层扫描工作流程
第1步：用primo微图案
通过使用PRIMO，一种允许控制细胞粘附，扩散和形状em.网格。它使得能够精确的细胞定位和优化的细胞扩散，同时离开表面em.网格的。该软件自动对齐您的模式在您的网格em.网格，确保您的单元为进一步处理的最佳位置。
了解更多PRIMO信息:https://www.alveolelab.com/our-products/primo-micropatterning/
步骤2:玻璃化
在冷冻之前，将样品保持在稳定温度的湿度控制的环境室中。
然后通过冻结自动暴露冰柜，样品蒸煮em.GP2。玻璃化方法抑制冰晶形成，确保细胞含量尽可能接近天然状态。
第3步：选择
为了实现高效的工作流程，必须预先选择合适的单元和目标区域。这是通过使用低温光学显微镜来实现的雷霆成像er em cryo克莱姆。然后可以将样品转移到Thermo Scientific™Aquilos™进行铣削。仪器之间的完全连接意味着确定的区域和坐标是安全的，精确地转移到Aquilos的立即重新定位。无需投资时间搜索相关的目标位置！
为避免污染珍贵的标本，集成的Cryo断层摄影工作流程确保了所涉及的系统之间的样本的安全传输。专用墨盒系统在整个工作流程中保障您的样本，为您的可靠科学效果提供实心的基础。
（Thermo Scientific，Krios和Aquilos是Thermo Fisher Scientific的商标。）
第4步：铣削
预选后，在雷霆成像仪中瞄准em.低温CLEM，样品被转移到Thermo Scientific Aquilos.，专用的Cryo Dualbeam电子显微镜。
在过去，不可能以亚纳米的分辨率分辨细胞内部，因为许多样品太厚，无法用低温电子断层扫描成像。
Aquilos通过采用扫描电子束来克服厚度限制（SEM.)和聚焦离子束(撒小谎)．当电子束用于成像时，一束镓离子确保了玻璃化电池的精确研磨。
通过铣削过程，产生薄冰片，形成在网格薄片，然后可以使用电子断层扫描检查。
步骤5:3D低温断层扫描
这em.带有在网格薄片的细胞的电网从Aquilos转移到Thermo Scientific Krios™G3i（冷冻TEM)．
的低温TEM通过逐渐倾斜样本，从不同的角度多次成像感兴趣的区域。
单个图像被计算和重建，以产生来自薄片的三维断层照片及其在亚域分辨率中的内容。
