EM Cryo CLEM是我们低温工作流程中的一个关键元素。我可不想错过。

Yannick Schwab博士,德国海德堡EMBL电子显微镜核心设备组长

我们决定继续使用THUNDER Imager EM cryoclem系统,以确保其卓越的图像质量和在成像期间保持样本安全的能力。

Dorit Hanein,法国巴黎巴斯德研究所结构生物与化学系,细胞大分子机器结构研究实验室教授

HeLa细胞没有THUNDER成像仪
HeLa细胞与THUNDER成像仪

用雷声识别你的感兴趣地区的形象

为了获得蜂窝结构的最佳可视化,雷霆成像仪EM Cryo Clem将高分辨率的Cryo目标与Leica Microsystems的迅速技术相结合。188金宝搏的网址结果是清脆,无阴霾图像。

雷声采用了创新的徕卡计算清除方法,以消除在广域观测中可能出现的失焦模糊。THUNDER成像仪EM cryoclem还包括一个50x / 0.9 NA物镜。与常用的长工作距离物镜不同,这一透镜是专门为玻璃化样品的高分辨率成像而设计的。您将受益于更好的识别和可视化细胞结构的细节,以及宽视场显微镜的速度和易用性。

互动图片:HeLa细胞镀金上的金量子R2 / 2涂层G200F1探测器网格。
用GFP-TGN46(反式GOLGI网络)和MCHERRY-LIFEACT(F-ACTIN)转染细胞。用Hoechst 33342染色核。伦敦弗朗西斯克里克学院露西Collinson的样本由伦敦(英国)。

简单的、可再生的工作流

如果您需要在电子显微镜中快速找到您的兴趣区域,那么您可以轻松选择标记它并在标本转移期间导出坐标。直观的软件通过工作流程指导您,因此您可以快速有效地获得支持成功的EM调查所需的结果。对于高分辨率,无模糊效果,然后用雷声处理您的图像。

受益于:

  • 简单,精确的目标和数据捕获-软件指导您一步一步地通过成像工作流程
  • 无忧无虑的成像 - 只需标记您的感兴趣地区,软件会自动捕获并精确缝合镶嵌图像
  • 使用THUNDER进行高分辨率、无模糊图像的后期处理
  • 快速,可重复的结果-您可以保存和回忆完整的实验设置
雷霆成像er em cryo克莱姆
细胞在EM网格上的荧光图像可视化和选择性标记的EM cryoclem。
在Thermo Scientific Aquilos上使用坐标标记可视化和检索的完全相同的单元格。

易于检索与坐标转移利用低温光学显微镜

雷霆成像仪EM Cryo Clem的集成软件不仅指导您通过您的成像工作流程,它还只需单击一下即可导出原始图像数据和关联的坐标。您可以立即将蜂窝目标区域重新定位在优选的电子显微镜中,并开始调查样品超微结构。

如果您选择使用Thermo Fisher Scientific Maps EM,您可以使用我们的共同开发低温电子断层摄影工作流程.从EM GP2的玻璃化到Thermo Scientific Krios™G3i低温TEM的3D图像重建,整个工作流程确保了完全集成。

互动图片:选择和检索坐标。在EM网格上的荧光图像可视化和选择性标记。在Hirtho Scientific Aquilos上,可视化并重新定位和重新定位的细胞。

低温条件维护

为了使实验结果的成功概率最大化,独特的筒体系统和封闭的冷冻阶段确保您的标本保持玻璃化。该系统最大限度地减少了在加载和转移过程中,甚至在长期图像记录的污染的可能性。

它是如何工作的

药筒系统(1)允许安全、快速地处理标本。压力机和夹紧机制加快了样品吞吐量和加载时间的网格进入低温阶段。

穿梭扩展坞(2)通过维持最佳温度来保护Cryo样品。

具有同步物镜盖的Cryo阶段(3)通过使其保持稳定的超压来防止样品的空气污染

使用传输穿梭机将网格墨盒装入THUNDER成像仪EM cryoclem

使用THUNDER Imager EM Cryo CLEM优化您的工作流程

通过集成THUNDER Imager EM cryo CLEM,增强您的低温CLEM和低温网格板工作流。

为了使您的样品制备过程更加可靠和高效,我们与我们的合作伙伴Alvéole和赛默飞世尔科学建立了合作关系。

数据由德国马普生物化学研究所分子结构生物学系B. Engel博士提供。原出版:Albert S, Schaffer M, Beck F, Mosalaganti S, Asano S, Thomas HF, Plitzko JM, Beck M, Baumeister W, Engel BD。

冷冻电子断层图的分割,显示细胞核周围天然的细胞环境。蛋白酶体与核孔复合物(紫色)有两个不同的位点(橙色:膜系蛋白酶体,黄色:篮系蛋白酶体,蓝色:游离蛋白酶体)。核膜(灰色),核糖体(黑色/白色)和线粒体(红色,带有黄色ATP合酶)也被显示出来。

电池定位与PRIMO Alvéole

用Primo控制电池粘附位置和EM网格上的展开形状,来自Alvéole的无掩模微图案系统。请放心,您将获得包含您正在寻找的目标结构的良好的单元格。首先可以作为第一步添加到所有Cryo Clem工作流程中。

完全集成的Cryo电子断层扫描工作流程,带有Thermo Fisher Scientific

我们与Thermo Fisher Scientific密切合作,开发了一个完全集成的低温电子断层扫描工作流。THUNDER成像器EM Cryo CLEM和Aquilos Cryo FIB-SEM可以无缝地相互通信。它们能够快速检索目标结构,并在系统之间安全地传输样本。

了解更多有关PIMO的整合和我们共同开发的工作流程与Thermo Fisher Scientific在这里。

点击下面的工作流解决方案,学习如何实现高质量的结果。有关生命科学研究的工作流解决方案的更多信息,下载我们的工作流小册子

(1)EM网格没有微图案|(2)电池粘附对照用Primo |(3)玻璃化|(4)选择|(5)铣削|(6)3D Cryo断层扫描|(7)细胞背景下的蛋白质

低温CLEM工作流

如果您想准备组织样本,请将雷霆成像仪EM Cryo Clem添加为Cryo Clem工作流程中的中间步骤。

它使您能够轻松识别感兴趣的区域,并在样品内的特定位置准备薄片。

(1)用Primo的细胞定位(2)高压冻结(EM冰)|(3)冷冻切片(EM UC7 / EM FC7)|(4)识别兴趣区域(雷霆Imager Em Cryo Clem)|(5)在TEM中的成像

Cryo in-grid薄片工作流(a)

为了获得可靠的结果来分析其本地环境中的蛋白质结构,请使用从Thermo Fisher中使用完全集成的工作流程与Cryo-Fib SEM。

选择最合适的单元格,用于使用雷霆成像仪EM Cryo Clem进行分析,并将坐标转移到您可以立即检索它们的Thermo Scientific Aquilos。Aquilos克服了厚度限制并产生薄冰片,然后可以在TEM中检查。

低温网格薄片工作流程-使用Thermo Fisher Aquilos低温fib扫描电镜。(1)用PRIMO |定位细胞(2)骤冷(EM GP2) |(3)识别感兴趣区域(THUNDER Imager EM cryyo CLEM) |(4)用Thermo Fisher Aquilos cryyo FIB SEM | (5) TEM成像

Cryo在网格薄片工作流程(b)

THUNDER Imager EM Cryo CLEM可以集成在每个FIB-SEM工作流程中。

我们的产品可以无缝连接,确保安全的样品传递整个过程。

Cryo On-Grid Lamella工作流 - 除了Thermo Fisher Aquilos Cryo-Fib SEM外,所有FIB-SEM供应商。(1)用Primo的细胞定位(2)暴跌冻结(EM GP2)|(3)识别兴趣区域(雷霆成像仪EM Cryo Clem)|(4)转移(EM VCM)|(5)涂层(EM ACE600 / EM ACE900)|(6)转移(EM VCT500)|(7)在FIB铣削|(8)在TEM中的成像

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