比以往任何时候都更详细地分析活体的能力

STELLARIS 8 DIVE为您提供超过1毫米深度的灵活多色成像。由于4Tune是一种光谱可调的非去扫描探测器,您可以同时定义多达四个探测波段,或者在发射光谱的任何地方连续成像时可以定义无限个探测波段。它使您能够灵活地适应所需的荧光团组合。使用STELLARIS 8 DIVE,您可以使用超过十亿种可能的荧光团组合进行多光子实验,使您能够更详细地研究复杂的过程,如神经元连接、器官结构、动态相互作用或细胞和蛋白质的空间关系。

研究活标本的转移,使用四种或四种以上的颜色来区分相关蛋白质,清醒小鼠的海马活动,或固定的厚肠切片的结构,用STELLARIS 8 DIVE!

传统的二向色法从来都不是区分所有荧光团的最佳方法,但有了光谱检测器,这现在是可能的,而且更容易,因为我们可以真正优化每个荧光团想要检测的波长。

Jacco van Rheenen教授。荷兰癌症研究所,阿姆斯特丹(荷兰)。

活的小鼠大脑皮层,带有基因标记的神经元(绿色为GFP)和小胶质细胞(黄色为YFP),用Sulforhodamine标记的星形胶质细胞(蓝色),以及向尾静脉注射alexa680 -右旋糖酐染色的血管(红色)。整个堆栈为~ 250 x 250 x 250 μ m。样品由德国波恩DZNE的LMF提供。

轻松潜水- 4Tune检测器

4Tune非去扫描探测系统可以配备2到4个探测器,并可以自由配置混合探测器(Power HyD NDD),光电倍增管(pmt),或两者的混合。发射光由可变二向色光和带通滤波器的组合分离。在整个可见光谱(380 - 800 nm)自由调整您的探测!

4Tune用户界面允许您通过简单的拖放来优化多个转基因标记的发射设置。由于其清晰直观的设计,操作它很容易,只需要很少的培训。

有了STELLARIS 8 DIVE,您将拥有所有现有和新开发的转基因标记,并为未来的新开发提供证明!

1)可变二向色(VD)。2)可变带通(VB)。3)动力HyD NDD或PMT。底部:直观的4Tune用户界面允许轻松设置从380到800 nm的所有颜色的检测窗口。

深入探索新的维度

通过STELLARIS 8 DIVE,您可以获得最深刻的见解和最精细的细节。所有激发光束都可以使用新的Vario光束膨胀器(VBE)对任何目标进行最佳的独立调整。

VBE允许根据您的研究问题优化共定位和正确的分辨率和深度平衡。

小鼠大脑皮层,Thy1-eYFP。采用最佳深度设置,穿透深度提高20%。IRAPO 25x1.0 W马达。样品由德国波恩DZNE光学显微镜设备Kevin Keppler提供。

优化的深度和分辨率与Vario光束膨胀器

徕卡Vario光束膨胀器VBE结合可调谐光束直径和可调谐发散。这为您提供了最大的深度,最好的分辨率和全色彩校正。

可调谐的光束直径的最佳平衡的分辨率和深度

STELLARIS 8 DIVE可以让您适应您的样品要求。使用Vario扩束器,您可以选择:最大分辨率(由物镜完全照亮的后孔径产生)和最大穿透深度(由后孔径略微填充不足产生)。欠填充后孔径会导致更大的焦体积和更短的路径长度,从而导致更有效的激发。

可调光束发散全彩色校正

我们的红外APO物镜在红外范围内没有色差。然而,使用STELLARIS 8 DIVE,您可以使用适合红外的物镜以及多条红外激光线:Vario光束扩展器可用于校正色差,并实现有意义的多色实验。

可调谐Vario扩束器(VBE)

利用无标签成像技术拓展深度活体实验的潜力

胶原蛋白和弹性蛋白等分子在癌症等疾病中起着相关作用。我们的4调谐探测器可以使用第二和第三次谐波产生的信号,使您可以研究这些重要的结构而不染色。

DIVE与STELLARIS的结合还可以使用荧光固有的基于寿命的信息。这种能力允许您通过NADH或FAD的终生成像来进行样本的代谢映射等实验。

五彩纸屑小鼠小肠:胶原蛋白1显示为灰色(无标记SHG),谱系追踪干细胞显示为青色、绿色、黄色和红色。干细胞在癌症在生物体内的扩散中起着重要作用。样本由荷兰癌症研究所Jacco van Rheenen提供。

轻松导航组织,无需额外染色

在组织中导航通常需要方向性标志来知道感兴趣的区域位于哪里。胶原蛋白的脚手架特性可以帮助在组织中导航,并在不需要反染色的情况下找到感兴趣的区域。

大多数生物组织都含有胶原蛋白,胶原蛋白是结缔组织的主要成分。例如,肠道周围有一层胶原蛋白。通过收集激发波长的1 / 2处的发射信号,可以很容易地在多光子显微镜下观察胶原蛋白。使用4Tune灵活的检测窗口,可以使用任何波长来收集该信号,因此不需要额外的标签或工作。

一旦显微镜观察到胶原蛋白结构,她就知道她感兴趣的组织(这里是肠道中的干细胞)已经接近了。

五彩纸屑小鼠小肠:来自SHG,灰色表示胶原蛋白1,青色、绿色、黄色和红色谱系显示干细胞。样本由荷兰癌症研究所Jacco van Rheenen提供。

结合多光子成像和生命周期信息研究代谢变化

代谢变化是组织健康的重要标志。

STELLARIS 8 DIVE为您提供了TauSense的所有优点,这是一套基于荧光寿命的成像工具。当细胞的代谢状态发生变化时,可以通过分子(如NADH)荧光寿命的变化来可视化。NADH在糖的代谢中起主要作用,其荧光寿命依赖于葡萄糖浓度。由于引起葡萄糖分解的生化反应而发生的构象变化改变了NADH荧光寿命。

对于全定量荧光寿命分析,STELLARIS 8 DIVE可以与FAst寿命对比(FALCON)相结合。

葡萄糖处理前后培养的HeLa细胞的NADH自身荧光左:TauContrast定性结果。右图:FALCON中使用相量图的定量分析。

为你的多光子实验增加额外的维度

自体荧光是一种来自组织的自然荧光发射,来自内源性荧光团,如NADH或FAD等小分子,或组织结构。当对标本进行成像时,常常会产生问题。但如果你能利用它呢?

由于DIVE和TauSense的结合,您现在可以使用基于寿命的分离从自动荧光信号中获得有价值的信息。此功能为您提供了一个额外的渠道,使您能够从有价值的样本中获得更多信息。

肾脏切片用RapidClear清除,并用多光子激发成像。第一幅图像是强度,第二幅是TauContrast(激发波长为850 nm),第三幅来自四个光谱通道,其中红色表示血管(AF488,激发波长为920 nm),灰色胶原蛋白(SHG),绿色神经细胞(SytoxOrange,激发波长为1040 nm),蓝色核(AF633,激发波长为1100 nm)。由孙金实验室提供。

获得star aris独特的软件功能的生产力

多光子系统的使用通常是严格的,需要适应每个实验和用户。再加上使用活体动物或新鲜移植组织的压力,你很快就会明白在做多光子实验时具有灵活性的优势。由于多光子功能无缝集成到STELLARIS软件中,STELLARIS 8 DIVE为您提供了一个从设置到最终结果的简单,无忧的工作流程。

  • 无缝实验设置与ImageCompass
  • 用LAS X Navigator在样本上查找感兴趣的区域的直观方法
  • 通过动态信号增强提高速度和分辨率
肠切片,直径3.5 mm, RapidClear清除,Navigator成像:B/W: SHG -胶原蛋白;蓝色:Sytox橙-核;绿色:Alexa 633 -神经细胞;红色:Alexa 488 -血管。由孙金实验室提供。

使用ImageCompass轻松快速地设置多色多光子成像

STELLARIS 8 DIVE多光子硬件完全集成到STELLARIS的ImageCompass接口中,允许您轻松地定义您的实验设置,以便快速启动。

利用广泛的荧光团数据库,系统可以自动定义MP的激发和发射。也可以手动定义,只需单击几下即可。连续设置和快速实时,3D查看器-多色多光子成像从来没有那么容易。

ImageCompass提供了stararis 8 DIVE硬件的完全控制,并允许轻松定义实验设置。

立即探索相关的细节,同时始终保持对样本的概述

LAS X Navigator是一个功能强大的导航工具,使您能够快速地从逐个图像搜索切换到查看示例的完整概述。多亏了DIVE和STELLARIS的集成,您的多光子实验可以变得更高效。受益于在大型复杂样品中自由导航的能力,提供快速概览、多位置成像和平铺扫描的深度多色成像。

长1厘米,厚0.5毫米的肾脏切片马赛克图像很容易获得,并提供了肾脏神经细胞和胶原蛋白系统的全图(这里是与TauContrast结合使用)。

肾脏切片(SunJin实验室,RapidClear清除)用LAS X Navigator和TauContrast成像。一整片10 x 7毫米,500微米厚。蓝色表示胶原蛋白(SHG信号)到达时间较短,绿色表示神经细胞被Alexa 633染色。

活鼠脑皮层:绿色为Thy1-eYFP皮质神经元,b/w为血细胞游离三次谐波信号。激发:1300nm。样品由德国波恩DZNE LMF提供。

动态信号增强:

维持体内快速过程的分辨率

活标本的处理速度可以很快。然而,动物模型的荧光信号往往很弱。

解决这两种挑战的解决方案是动态信号增强。它允许对更好的S/N进行平均,因此,更好的分辨率,同时适应样本的动态。

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