具有时间门控检测的双光子激发STED显微镜

我们报道了一种新型的双光子激发受激发射耗尽(2体育-发生的)基于时间门控检测的显微镜。时间门控检测允许使用中等的受激发射光束强度有效地沉默荧光团。这为实现高效的2体育-发生的受激发射光束在连续波中运行的显微镜。连续波受激发射光束降低了激光结构的复杂性和成本，但时间门控检测降低了图像的信噪比(SNR)和信背景比(SBR)。我们通过多图像反褶积算法恢复信噪比和SBR。事实上，该算法同时重新分配早期光子(通常被时间门控检测丢弃)到它们原来的位置，并去除受激发射光束引起的背景。我们举例说明这种实现的好处成像亚细胞结构。最后，讨论了该算法对未来全脉冲算法的扩展2体育-发生的基于时间门控检测和纳秒激光源的实现。