使用单个激光束对的双色定型突触显微镜

超级化学显微镜的出现已经开辟了新的研究机会，进入生活生物标本内纳米级的动态过程。这对于突触尤其如此，这些突触非常小，高度动态，嵌入脑组织中。刺激的排放耗尽（st）显微镜，最近开发的激光扫描技术已被证明非常适合使用黄色荧光蛋白作为单一标记的脑切片中的成像突触。然而，非常希望能够使用两种不同的荧光团以形成突触前置和突触后刺，它们一起形成突触。作为st显微镜使用单独的激光束进行荧光激发和淬火，掺入多色成像st比传统的光学显微镜更困难。虽然存在双色方案st显微镜检查，这些方法由于它们的复杂性，成本和与常见标记策略和荧光团不相容而具有几个缺点。因此，我们旨在为双色制定直接的方法st允许使用流行的绿色黄色荧光标记，如绿色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，Alexa Fluor 488和Calcein Green。我们的新（对我们的知识）方法是基于单励磁/st激光束对以同时激发和骤冷对这些荧光团的对，其信号可以通过光谱检测和线性解弹性分离。我们通过在活有机型脑切片中的轴突Boutons和树突刺的双色超级化时间延时成像来说明这种方法的潜力。