已解决的字段编号（RFN）

摄像机具有固定的观察场，不能扫描显微镜光学的全视场。因此，视场必须减少(通过插入额外的光学元件)，以便图像可以在没有损失的情况下投射到相机传感器上。

在扫描显微镜中，像真正的共聚焦激光扫描仪，FN表示样品可以被扫描的最大面积，但实际扫描过程必须设置正确的参数或分辨率可能会丢失。这种情况通常意味着应该观察更小的字段或使用非常大的图像格式。为了能够比较这些限制，引入了一个修改字段数(RFN)。RFN为最大分辨场。

显微镜中的场数（FN）被定义为可以通过目镜观察的中间图像平面中的区域的直径。例如，20mm的磁场数表明，物镜放大后观察到的样品区域限制在直径为20mm。如果物镜具有倍率，例如具有20mm的Fn的40倍，则可以观察到直径为500μm的样品区域。

与D._场是观察样的样品区域的直径，MAG是物镜的放大因子。

通常放大率值刻在透镜筒上，场数刻在目镜筒上。有了这些信息，你就可以计算出你正在观察的视场的直径:

对于宽场显微镜，FN由目镜中的金属隔膜的直径设定。它的尺寸设置为确保观察到的领域内的良好图像质量，因为所有光学系统都会导致远离镜头中心的光学像差。然而，“优质”的定义仅为现场（1）的平整度标准化，留下讨论其他像差的空间。

在共聚焦扫描显微镜中，这样的中间图像实际上是不产生的。实际上，针孔位于中间像面上。通过针孔的强度作为时间的函数，为图像信息编码。这些强度变化随后被用来重建图像，通过分配适当的时间强度片段到一个框架存储。框架存储与样本中的焦点位置同步填充。框架的预先定义尺寸为x乘以y的图片元素(像素)。元组(x,y)称为扫描格式或有时称为扫描分辨率(不要与光学分辨率(2)混淆)。

因此，用于共聚焦显微镜的计算的FN是样品的扫描场大小乘以倍率。中间图像在成像期间不会出现。通过调整扫描幅度，观察到的字段可以从最大降至零（3）来改变。零幅度是指样品中的单个固定点被观察到，如荧光相关光谱所需的（FCS）。中间幅度生成小于最大值的字段，构成变焦功能，因为较小的字段显示在相同的监视器大小上，因此表示额外的“放大”（不是光学倍率）。

光学分辨率（D_一个)可由Abbe公式确定:

在维_一个是两个无限小的“点”物体的距离可以刚刚分离，L的照明光的波长，并且是物镜的数值孔径。显然，镜片的放大率对光学分辨率没有影响。

当扫描样本并将强度存储到数字图像中时，为了保持光学分辨率，从样本背面投射的图像元素的尺寸应小于光学分辨率。否则，数字图像比光学图像具有更少的信息。一般来说，我们假设1 / 2乘以d_一个作为一个适当的过采样(特殊的图像恢复算法通常要求更高的过采样，高达四倍)。所需的最小像素大小(d_p因此，可以计算为：

为了表征共聚焦扫描显微镜的功率，不适宜讨论视场作为全面积的光学校正，而是可以在没有光学分辨率的情况下扫描的领域。最大的矩形扫描格式（x，y）_马克斯，我们可以计算已解决的字段大小（d_{sc res})：

例如，如果我们假设λ= 500 nm和na = 1.4，我们有d_p= 90海里。如果扫描格式为x = y = 1000像素，则该字段将覆盖90 x 90µm的面积。

如果我们使用具有63倍的放大率的透镜，则计算出的字段（Fn的等式1）将对应于中间图像平面中的5.6mm×5.6mm的面积。该方形的直径仅为8毫米，比设计显微镜的典型FN小得多。

方程5的乘法通过使用镜头的放大因子，我们得到了相当于Fn的数量，但现在考虑实际扫描条件。我们称之为已解决的字段号RFN：

我们假设显微镜的FN为22毫米(图1，左)。我们使用放大率为40x的透镜，NA为1.3，光波长为500nm，我们扫描一个x = y = 2496像素的正方形(考虑仪器能扫描的最大值)。RFN等于13,6毫米。

在第二个例子中，我们假设显微镜的FN为25毫米(图1，右)。使用相同的镜头(40x/1.3)和波长(500纳米)，但仪器被限制为1024像素每维。根据方程6，我们计算出RFN为5.6 mm。虽然在这个例子中，FN名义上比上一个大一些，但可用的扫描区域要小得多(如果我们不接受分辨率上的损失)。