De Mendoza Th,Balana B,Slesinger Pa,Verma IM:
有机型小脑培养物:凋亡挑战和检测
J. Vis。Exp。51:E2564;DOI:10.3791 / 2564(2011)
1947年首次通过高血管引入神经元组织的有机型培养物,并构成了神经科学领域的重大突破。从那时起,该技术进一步开发,目前有许多不同的方式来制备有机型培养物。这里呈现的方法是由Stoppini等人所述的调整。用于制备切片和Gogolla等人。对于染色程序。
这种技术的独特特征是它允许您在原始结构中研究大脑(如海马或小脑)的不同部分,从而提供了对解离培养物的一个很大的优势,其中所有细胞组织和神经元网络被破坏。在小脑的情况下,它更有利的是,它允许对Purkinje细胞进行研究,极难获得作为解离的原发性培养物。该方法可用于研究体外小脑的某些发育特征,以及野生型和突变小鼠的电生理学和药理学实验。
这里描述的方法旨在研究凋亡刺激如凋亡刺激在显影细胞中的疗效,使用TUNEL染色来测量凋亡细胞死亡。如果TUNEL染色与细胞类型特异性标记相结合,例如PURKINJE细胞的CALBINDIN,则可以以细胞种群特异性方式评估细胞死亡。Calbindin染色还用于评估小脑培养物的质量。
J. Vis。Exp。51:E2564;DOI:10.3791 / 2564(2011)
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