监测感染的免疫抑制机制

流感病毒感染可致肺上皮组织损伤。损害的程度取决于病毒株和宿主的易感性［1］．研究病毒感染引起的肺损伤的目的之一是更好地了解肺基底样结构的退化是如何被抑制和免疫抑制被激活的［1，2］．本研究研究了波多黎各8株流感病毒对小鼠肺上皮诱导损伤的影响［3］．利用荧光显微镜来评估肺组织中基底细胞扩张的起始和免疫抑制机制的激活。

对于这类研究，重要的是要有一个成像解决方案，能够快速筛查肺组织和检测灵敏度，以实现高通量，因为图像采集速度通常是一个瓶颈。该应用程序还要求优越的图像质量来解决感兴趣的结构。为了研究较厚的肺组织切片，该解决方案还应该在组织深处的点进行良好的对比成像。宽视场显微镜为用户提供了速度和检测灵敏度，但当成像厚组织样本时，往往会出现“模糊”或“薄雾”，这是由于样本中的失焦平面发出的信号降低了图像对比度［4］．

本研究以小鼠为模型生物，观察小鼠肺上皮组织切片。用波多黎各8株流感病毒接种小鼠，诱导肺上皮损伤。在病毒感染两个月后采集肺活检。肺组织用角蛋白5和PDL1免疫荧光染色，角蛋白5呈绿色，表明基底细胞扩张，PDL1呈红色，表明免疫抑制机制。肺切片图像通过高速、3通道磁片扫描获得THUNDER Imager 3D细胞培养使用即时计算清除(ICC)来去除失焦模糊或模糊[4]。快速的扫描速度和实现高吞吐量的灵敏度对这一应用非常重要，同时优越的图像质量可以解决感兴趣的结构。为了达到这些要求，平铺扫描采用20倍放大，0.8数值孔径(NA)，平面远距物镜。

下面的THUNDER图像显示了老鼠肺组织的切片。这些图像使免疫抑制机制的标记物和肺基底样结构的回归得以监测。

结果表明THUNDER Imager 3D细胞培养使用即时计算清理(ICC)［4］能够实现肺组织切片的快速筛选和清晰成像。在研究流感病毒感染如何造成肺部损伤时，能够快速、清晰地成像组织切片有助于提高效率。