如何结合STED和清晰度

以前，研究肾脏最细微的部分，如足突和狭缝隔膜的首选方法是使用电子显微镜。使用发生的显微镜，我们表明，纳米尺度的定位狭缝隔膜蛋白现在可以解决使用光学显微镜。即使纳米分辨率已经有十年了，但在文献中还没有发现对狭缝隔膜的光学显微镜研究。这可能是由于实现超分辨率显微镜所需的高质量荧光标记的困难。

通过应用一种基于的光学清除协议清晰技术上，我们发现肾脏组织的免疫染色质量可以得到改善。这种改善可能是由于去除脂质，与PFA固定的未清除组织相比，清除组织中结合表位的可用性更高。光学清除组织，安装在折射率匹配饱和果糖溶液中，也提供了执行的机会三维STED成像在至少30微米的深度，不需要球面像差校正。这允许在完整组织的3D视角上对足突形态和蛋白质拓扑进行超分辨率研究，这可以增强我们对肾脏病理的理解。总之，我们报告了基于水凝胶的光学清除不仅有利于在毫米尺度上研究更大的样品，而且通过提高染色效率，在纳米尺度上也是如此，这是一个对超分辨至关重要的参数发生的显微镜。