小鼠脑或脊柱损伤后轴突再生的评价

轴突无法再生和神经再生后的创伤和疾病，如脊髓损伤(SCI)，中风，创伤性脑损伤(TBI)，或多发性硬化症(MS)，导致灾难性的预后患者(1 - 3)．大量的研究已经确定了两大类轴突生长抑制蛋白(AGI)，它们负责轴突生长阻滞［1］．这些是髓磷脂相关抑制剂(Nogo, MAG, OMgp)和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)。在体内否定这些抑制剂活性的实验表明，受损轴突的再生略有增加，但功能的恢复更为显著［2］．与“长距离”轴突再生介导的功能恢复相比，另一种假设是脊髓损伤后完整的脊髓回路的重组［３］．这类实验的目标之一是评估完整的脊髓回路替代失去的连接的潜力，并进一步确定否定AGIs的行为是否支持适应或不适应的轴突重组。

在本研究中，使用了宽视场显微镜和THUNDER成像技术。我们的目标是看看在筛选活性轴突和非活性轴突的效率上是否有差异。

标本
本研究使用了小鼠模型生物。采集荧光标记的小鼠脊髓切片。通过计数注射消除AGI作用的区域的活跃轴突来确定实验治疗的疗效。

成像
图像数据通过aTHUNDER成像仪3D组织徕卡微系统188金宝搏的网址。一堆10架z -plane被一架PL带走7月10X/0.45物镜和DFC9000 GT sCMOS相机。

结果
小鼠脊髓切片的图像如图1所示。左边的图像(图1A)是作为最大强度投影(MIP)显示的原始宽场荧光图像。右侧图像(图1B)是使用THUNDER技术中的大容量即时计算清理(LVICC)处理的相同数据的MIP。断开的、不活跃的轴突发出绿色荧光，而重新连接的、活跃的轴突发出红色荧光。

结果(图1)表明，与标准宽视场图像相比，THUNDER图像可以更好地识别红色(活性)与绿色(非活性)荧光轴突的位置和数量。基于这一结果，THUNDER成像可以更快地筛查轴突，从而更有效地确定实验治疗的有效性。那些被发现最有价值的治疗方法可以被进一步研究，作为在脑或脊髓创伤或疾病后对抗AGI蛋白影响的潜在方法。

图像数据由美国康涅狄格州纽黑文耶鲁大学医学院神经病学和神经科学教授William Cafferty提供。