Caballero M, Lightfoot jr MD, LaPaglia M, Pleasant A, Hatada S, Cairns BA和Fair JH:
用荧光立体显微镜检测胚胎干细胞肝移植的特性
中华外科研究141 (2):7 (2007),pm17543343, PMCID 2082135, DOI: 10.1016/j.jss.2006.04.041
背景:胚胎干细胞(ES)已被研究作为一种潜在的替代治疗衰竭器官,如肝脏。然而,由于移植效率低,从候选干细胞中检测肝移植一直是困难的。以往的检测方法要求移植物采用分子和/或免疫组化技术处理,限制了进一步的功能研究。本研究评价了三维荧光立体显微镜对胚胎干细胞来源肝移植的大体检测。
材料和方法:表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)的小鼠胚胎干细胞进行定向内胚层分化。三分之二肝部分切除术后3天,将细胞注入肝实质,10 ~ 20 d取肝,用GFP2长通滤光片(100447084;188金宝搏的网址莱卡微系统公司,Wetzlar,德国)。采用定量聚合酶链反应(q-PCR)检测组织中EGFP mRNA的存在,评估该检测的灵敏度和可靠性。
结果:11例标本中有5例在荧光显微镜下检测到egfp阳性细胞。q-PCR检测EGFP mRNA。荧光立体显微镜下仅1例为阴性,q-PCR检测为阳性(P < 0.02)。
结论:采用GFP2长通滤波器的三维立体显微成像技术是一种强大而快速的筛选工具绿色荧光蛋白-ES衍生肝移植。
中华外科研究141 (2):7 (2007),pm17543343, PMCID 2082135, DOI: 10.1016/j.jss.2006.04.041
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