摘要

一种基于mturquoise的营地传感器,用于FLIM和比率读出改进了动态范围

烦恼基于环腺苷单磷酸(cAMP)的传感器已经彻底改变了这种重要的细胞内信使的研究方式。目前流行的传感器由camp结合蛋白Epac1组成,夹在合适的供体和受体荧光蛋白(FPs)之间。通过Epac1构象的改变,细胞cAMP水平的改变导致烦恼最常被荧光寿命成像(这部电影)或通过敏化发射(SE),例如通过简单的比值成像。我们最近报道了一系列不同的基于epac的cAMP传感器,具有高动态范围和信噪比。我们发现,以青色FP为供体的结构最适合SE读取,而其他以绿色FP为供体的结构似乎更适合SE读取这部电影检测。在本研究中,我们提出了一种新的cAMP传感器,称为TEpacVV该组织聘请mTurquoise为捐赠者。在光谱上与CFP非常相似,mTurquoise的量子效率是CFP的两倍,与CFP不同的是,它的荧光衰减是严格的单指数衰减。我们表明,TEpacVV似乎是最理想的检测这部电影和SE,它有突出的烦恼跨度和信噪比,提高了光稳定性。因此,TEpacVV应该成为新的实验的cAMP传感器的选择,无论是这部电影和比率计检测。

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karenbeek JB, Goedhart J, Hink MA, Gadella TWJ, Jalink K:
一种基于mturquoise的营地传感器,用于FLIM和比率读出改进了动态范围

PLoS ONE 6 (4): e19170 (2011);doi: 10.1371 / journal.pone.0019170

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