将动态活细胞数据放入超微结构背景中

活细胞CLEM工作流-徕卡纳米工作流

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使用徕卡Nano工作流,大海捞针是过去的事了。利用相关光镜和电子显微镜在正确的时间直接识别正确的细胞,并将动态活细胞数据纳入其超微结构背景。

由于无缝接口和快速传输,这些宝贵的事件可以快照冻结在几秒内使用我们的新兴市场ICE高压冷冻机。这种方法允许研究特定时间的事件新兴市场决议。Nano工作流程为您提供了一个集成的解决方案,从目标定位到洞察,这将促进您的研究。

#捕捉生活发生的瞬间

超微结构背景下的动态过程

现在,当分析广泛的生物事件,如细胞内运输、核膜形成或有丝分裂纺锤体组装时,没有必要猜测其潜在机制。纳米工作流程是一个经过验证的解决方案,结合了活细胞相关光镜和电子显微镜(CLEM),通过高压冻结的特定时间固定,使动态事件的研究具有纳米分辨率。通过结合动态数据和荧光活细胞成像的特定目标实体,并精确定时,可以获得大量剩余的上下文数据新兴市场超微结构的分析。

耐心,时机和速度之间的平衡

许多电子显微镜的工作流程是从固定细胞开始,然后是样品制备和新兴市场成像。然而,表现出有趣行为的细胞却很少。让事情变得更复杂的是,细胞行为或感兴趣的过程可能是非常短暂的。寻找“正确的细胞”通常是非常耗时和乏味的工作,就像“大海捞针”。

的Live-cellCLEM工作流程允许您捕获相关生物过程的动态信息,当它发生时,使您能够把这些观察到他们的超微结构背景。使用徕卡Nano工作流,您可以放心地获得您正在寻找的结果。用光学显微镜在正确的时间找到正确的状态的正确的细胞,进行观察,将样品装入电子显微镜后快速可靠地取回。由于专门的SampLink腔室,您享受心灵的平静,同时寻找感兴趣的细胞与光学显微镜和快速“快照冻结”,它精确地在正确的时刻。

是放松的

由于开放式腔室设计和连续的气体交换,SampLink腔室保持活细胞健康,给您足够的时间选择和图像感兴趣的区域,直到您发现细胞的确切状态,您正在寻找。在你的细胞健康状况下降之前,没有快速做出决定的压力。

又快又准确

在您确定感兴趣的时间点后5秒内,SampLink腔室被转移到新兴市场ICE和细胞通过高压冷冻固定,用于进一步的下游分析。

动态进程的成像窗口

仅5秒的转移时间为活细胞中发生的一系列动态过程打开了一扇窗。通过一些经验,您甚至可以细化您希望在准备的样本中捕获的过程的准确时间点。无论您对囊泡运输和分类、丝状动力学、内吞作用、细胞迁移、胞质分裂或其他过多的生物过程感兴趣,纳米工作流程为您提供了互补的动态和超微结构信息。

在转移之前的充裕时间窗口确保您有足够的空间进行样品鉴定和成像。没有快速做出决定的压力,这是其他活细胞的特点CLEM系统中往往只有几分钟的时间来选择一个区域,你可以使选择更加平静,成功率增加,结果是更好的质量和更可重复。

为可重复的结果而简化的工作流程


样品制备

保持您的样品在最佳条件下

SampLink室,在没有任何生理中断的情况下,蓝宝石上的细胞培养、运输和成像是可能的,即使在实验室和显微镜设备之间运输细胞。

  • 由于开放的样品容器与连续的气体交换,允许在生理条件下的长期成像
  • 氧合培养箱系统在细胞培养和运输过程中的气体和温度控制

实时成像

优化的图像分辨率

为了在活细胞成像中获得最佳的分辨率雷声成像仪纳米配备了特定的蓝宝石适应浸没物镜。它能够实现高分辨率和简化活细胞成像,因为不需要使用浸渍物镜,而浸渍物镜会增加污染细胞的风险。SampLink腔室可以直接装入THUNDER Imager Nano。

  • 快速3D活细胞成像,更准确的研究生理和模糊去除,更好的目标识别与THUNDER
  • 由于与氧合系统的连接和通过显微镜的温度控制,使样品的生理条件稳定
  • 优化图像分辨率,配备40x / 1.1 NA蓝宝石校正水浸物镜

转移

时间是关键

为了最小化活细胞成像和冷冻之间的时间,Nano工作流程配备了一个直观的转移系统,允许用户在成像后直接启动冷冻,同时保持样本在生理控制下。

  • 使用传输捕获瞬态事件,传输时间少于5秒
  • 受益于带有补充消耗品的一体化软件包
  • 适应容易,快速适应新兴市场带有中间板滑动-2-释放机构的ICE

高压冷冻

最优样本固定

新兴市场,成像样本最终被冷冻固定。它是结合经典的高压冻结和新的工作流程解决方案的最佳系统。它不仅可以改造成Nano的工作流程,还可以与光刺激实验相结合。

  • 贴壁细胞完全玻璃化
  • Live-cellCLEM光刺激和电刺激可选升级,可以与光刺激实验结合吗
  • 最优的结果与市场领先的解决方案

冻结替换

下游的工作流

受益于我们建立的冻结替代下游工作流使用新兴市场AFS2新兴市场TRIM2,新兴市场UC7或新兴市场AC20准备你的样品供后续使用TEM成像。纳米工作流也适用于扫描电镜断层扫描分析。使用ARTOS 3D在晶圆上制备样品。

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