将动态活细胞数据放入超微结构背景中

活细胞CLEM工作流-徕卡Nano工作流

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在徕卡Nano工作流程中,大海捞针已经成为过去。利用相关的光镜和电子显微镜在正确的时间直接识别正确的细胞,并将动态活细胞数据放入它们的超微结构背景中。

多亏了无缝的界面和快速传输,这些宝贵的事件可以在几秒钟内使用我们的新兴市场ICE高压冷冻机。这种方法允许研究特定时间的事件新兴市场决议。Nano工作流为您提供了一个集成的解决方案,从目标到见解,这将促进您的研究。

#捕捉生活发生的瞬间

它们超微结构背景下的动态过程

现在没有必要猜测潜在的机制,当分析广泛的生物事件,如细胞内运输,核膜形成,或有丝分裂纺锤体组装。纳米工作流程是一个经过验证的解决方案,结合了活细胞相关光镜和电子显微镜(CLEM),通过高压冻结的时间固定,使动态事件的研究具有纳米分辨率。通过结合动态数据、荧光活细胞成像的特定目标实体和精确的时间,可以获得大量剩余的上下文数据新兴市场超微结构的分析。

耐心,时机和速度的平衡

许多电子显微镜的工作流程从细胞的固定开始,然后是样品的制备和新兴市场成像。然而,表现出有趣行为的细胞往往很少。更复杂的是,细胞行为或相关过程可能是非常短暂的。找到“正确的细胞”通常是非常耗时和乏味的工作,似乎是“大海捞针”。

的Live-cellCLEM工作流允许您捕捉相关生物过程发生时的动态信息,并使您能够将这些观察结果放入它们的超微结构背景中。有了徕卡Nano工作流程,您可以放心地获得您正在寻找的结果。用光学显微镜在正确的时间、正确的状态找到正确的细胞,观察它,并在电子显微镜上加载样品后迅速、可靠地取回。多亏了专门的SampLink室,您在用光学显微镜寻找感兴趣的细胞并在正确的时刻快速“快速冻结”它的同时,享受着内心的平静。

是放松的

由于开室设计和连续的气体交换,SampLink室保持活细胞健康,给您足够的时间选择和成像感兴趣的区域,直到您发现细胞的确切状态,您正在寻找。在你的细胞健康状况下降之前,没有压力让你迅速做出决定。

快速准确

在您确定感兴趣的时间点后5秒内,SampLink室被转移到新兴市场ICE和细胞通过高压冷冻固定,以便后续分析。

动态过程的成像窗口

短短5秒的转移时间打开了一个窗口,以广泛的动态过程发生在活细胞。有了一些经验,你甚至可以在准备好的标本中精确地确定你想要捕获的过程的时间点。无论您对囊泡运输和分类、丝足动力学、胞吞作用、细胞迁移、胞质分裂或其他生物过程感兴趣,纳米工作流程为您提供互补的动态和超微结构信息。

转移前的宽裕时间窗口确保您有足够的空间进行样品识别和成像。没有做出快速决定的压力,这是其他活细胞的特点CLEM系统中通常只有几分钟的时间来选择一个区域,你可以使选择更冷静,成功率增加,结果质量更好,重现性更强。

简化的工作流程,以获得可重复的结果


样品制备

保持你的样品在最佳条件下

SampLink室在没有任何生理干扰的情况下,蓝宝石上细胞的培养、运输和成像是可能的,即使在实验室和显微镜设备之间运输细胞。

  • 由于开放的样品容器和连续的气体交换,允许在生理条件下长期成像
  • 在细胞培养和运输过程中使用氧合培养系统控制气体和温度

实时成像

优化的图像分辨率

为了在活细胞成像过程中获得最佳分辨率雷声成像仪纳米配有特定的适合蓝宝石的浸没物镜。它可以实现高分辨率和简化活细胞成像,因为不需要使用浸入物镜,这增加了污染细胞的风险。SampLink室可以直接加载到THUNDER成像仪Nano。

  • 快速3D活细胞成像,更准确的研究生理学和模糊去除更好的目标识别与THUNDER
  • 由于与氧合系统的连接和显微镜下的温度控制,样品的稳定的生理条件
  • 配备了40倍/ 1.1 NA蓝宝石校正水浸物镜,优化了图像分辨率

转移

时间是关键

为了减少活细胞成像和冷冻之间的时间,纳米工作流程带有一个直观的转移系统,允许用户在成像后直接开始冷冻,同时保持样品在生理控制下。

  • 用少于5秒的传输捕获瞬态事件
  • 受益于包含互补消耗品的一体化包
  • 轻松快速地适应环境新兴市场ICE与滑动2-释放机构的中间板

高压冷冻

最优样本固定

新兴市场,图像样本最终被冷冻固定。它是将经典的高压冷冻与新的工作流程解决方案相结合的最佳系统。它不仅可以改进到纳米工作流程,而且还可以与光刺激实验相结合。

  • 贴壁细胞完全玻璃化
  • Live-cellCLEM由于可选的光和电刺激升级,能否与光刺激实验相结合
  • 最优结果与市场领先的解决方案

冻结替换

下游的工作流

受益于我们建立的冷冻替代下游工作流使用新兴市场AFS2新兴市场TRIM2,新兴市场UC7或新兴市场AC20为后续准备样品TEM成像。Nano工作流也适用于扫描电镜断层扫描分析。使用ARTOS 3D在晶圆上制备样品。

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