用剃须刀在一个造型蜡板上用3%戊二醛在pH 7.2的0.06M Sørensen磷酸盐缓冲液中切割一小片叶子(1mm2)。然后用水喷射真空泵将切片抽真空,在装有上述固定溶液的小瓶中抽真空最多10秒。
随后,将样品转移到网格宽度约200μm的小篮子中。这些篮子然后堆叠在一起,转移到单模腔徕卡EM AMW已装有装有上述固定溶液的小瓶。然后微波固定开始大约2分钟后的样品切割后,启动之前编程的协议。
透射电子显微镜样品制备(TEM),以制定一项标准方案,以减少样品制备时间TEM调查。因此,制备的叶片细胞的整体和精细结构徕卡EM AMW与常规固定方法制备的叶片细胞在室温下进行比较。此外,利用定量计算机支持的透射电镜测定了不同细胞间隔(叶绿体、细胞核和质膜)的膜直径。