科学报告2(2012年2月)274,doi:10.1038/srep00274
采用二谐波成像显微镜观察骨组织内胶原基质组织。本研究采用双光子激发荧光显微镜(2PEF)。SHG/2PEF显微镜是基于徕卡的TCS发生的连续波共振扫描器光谱共聚焦扫描头(徕卡微系统公司，曼海姆，德国)。188金宝搏的网址SHG以后向散射(BSHG)和透射光结构(前向二次谐波产生;FSHG)。由于激发波长设置为860 nm, BSHG感兴趣的光谱成分，415-445 nm，是通过徕卡内置的基于棱镜的分光光度计选择的，而FSHG是通过两个滤波器选择的，一个红外阻塞滤光片和430/30 nm带通彩色滤光片(HQ430/30 m, Chroma技术公司，Bellows Falls, VT, USA)。所有面板都使用76 nm像素尺寸和100x 1.4 NA油浸物镜(HCX PL7月100x/1.4石油，徕卡微188金宝搏的网址系统，曼海姆，德国)。SHG成像用于收集特定的组织基元，如内源性胶原蛋白的结构26。此外，由于SHG信号的相干性，输出的强度与观察到的蛋白质局部浓度的平方成正比，本质上是3D的。