果蝇幼虫 - Cryo-Sem的样品制备

果蝇幼虫在两个3mm铝狭缝载体之间夹在100μm腔体之间，彼此面向彼此，高压冷冻徕卡EM HPM100。使用乙醇作为同步培养基，用1-十六烯作为填料。狭缝载体的拇指填充在1-十六烯中浸入1-十六烯中的过滤器尖端，以保持载体夹层在冷冻后完成。

载体三明治安装在自制的3mm架上VCT100.装载站并转移到一个ACE900.使用VCT100 Shuttle和安装在ACE900上的VCT500码头的原型（通过适配器板连接）。冷冻阶段设定为-120°C，持有者坐在那里15分钟以达到均衡（自样本来自LN2.）。通过用压裂刀从顶部载体推开顶部载体，然后在-100℃下部分冷冻干燥5分钟来破裂样品。将样品涂覆（E-束蒸发=用2,5nm铂/碳的层，以45°的角度，然后通过倾斜0°和90°（摇摆）之间的阶段并旋转阶段。如果使用Leica将样品转移到低温阶段，如果Zeiss Auriga 40扫描电子显微镜使用Leicaem.VCT100班车在由冷却罩包围的高真空条件下保持样品。使用Inlens二次电子检测器在-115°C下获得图像。