高级相关光/电子显微镜：使用Tokuyasu冷冻切除术的当前方法和新开发项目

显微镜是分析细胞结构和功能的重要工具。随着新的荧光探针和超分辨率光学显微镜技术的出现，对活细胞中动态过程的研究非常促进。荧光光学显微镜提供了分析，定量和三维（3D）数据，重点是使用荧光标记分析活细胞。样品制备很容易且相对便宜，并且使用适当的标签提供了跟踪特定蛋白质感兴趣的蛋白质的能力。当然，只有电子显微镜（Em）在超微结构和蛋白质标记方面，达到了最高的定义。填补光学显微镜和Em，相关光和电子显微镜（克莱姆）策略已经制定。特别是，基于免疫的混合技术Em提供敏感的蛋白质检测以及有关细胞结构和蛋白质定位的高分辨率信息。通过将第三维添加到Em与电子断层扫描（ET）结合快速冷冻，克莱姆现在，技术为定量3D分析提供了其他工具。在这里，我们概述了应用的主要方法，并突出了该领域的最新进展克莱姆。然后，我们专注于两种使用冷冻切除术作为底物的底物进行综合分子成像的技术。最后，我们提供了该领域未来发展的观点。

图像：Mattioli L等人的细节：J。Histochem。细胞化学。57（12）：1103-11（2009），图2。©The Histomical Society，Inc.。