我们正试图通过构建更快、更有效的保持亚细胞分辨率的光板显微镜来推进这种权衡。我们的双光子光板显微镜结合了双光子显微镜的深度穿透和光板显微镜的速度,生成图像的成像速度和灵敏度提高了十倍以上。这种属性的组合允许4D细胞和分子成像具有足够的速度和分辨率,以产生明确的跟踪细胞和信号在完整的系统。
为了增加第五维度,即同时标记的数量,我们正在改进新的多光谱图像分析工具,这些工具在速度、误差传播和精度方面都超过了我们以前在线性分解方面的工作。这些新的分析工具允许对多重标记样本进行快速、明确的分析。
与此同时,我们有完善的无标记方法,使成像和传感可以扩展到患者来源的组织,甚至人类受试者。低浓度和低灵敏度的技术可能使单细胞方法具有挑战性。我们正在改进荧光寿命方法(这部电影),将其与多光谱工具相结合,在这些具有挑战性的环境中优化活体内成像。
综合起来,这些成像和分析工具提供了在完整系统中跟踪关键事件所需的多维成像,并允许我们使用噪声和方差作为实验工具,而不是实验限制。
学习目标:
- 生物成像涉及分辨率、速度、深度和视野之间的权衡
- 多重工具可以提高效率和标签的数量,可以成像
- 荧光寿命对于内在和外在标签来说是一个强大但未被充分利用的工具
- 相量方法可以提供更有效的处理,特别是在弱光条件下