小型无脊椎动物相关光镜和电子显微镜的精确和快速测绘方案

背景信息:CLEM(相关活细胞和电子显微镜)试图将不同成像策略获得的数据连接起来，通常是在光镜和电子显微镜之间。它已经成功地应用于细胞培养，尽管它在多细胞系统的应用受到定位ROI(感兴趣区域)困难的阻碍。

结果:我们开发了一个CLEM该技术使小模型动物易于处理，并适用于形态学和免疫电子显微镜标本的制备。虽然这种方法最初是为秀丽隐杆线虫样本，我们发现它同样适用于果蝇样本。它可以实时处理和观察任何复杂基因型的单个动物，高压冷冻固定，平埋固定。我们的主要改进是开发了一个精确的测绘系统，该系统大大简化和加快了ROI在1 μm距离内的回顾定位。该方法可成功应用于需要相关显微镜检查的病例，也可方便非相关病例的治疗TEM程序。我们的改进打开了用电子显微镜处理数量显著的动物的可能性，并大大简化了电子显微镜协议，使更多的研究人员更容易接触到它们。

结论:我们相信，该技术将有助于多细胞模型的相关研究，并将促进任何类型标本制备的耗时程序TEM．