故事

20年的徕卡激光显微解剖

表型-基因型相关性是洞察的关键。因此,《从眼睛到洞察》完全适合徕卡微系统,特别是激光显微解剖。188金宝搏的网址激光微生物,也被称为LMD.或lcm(激光捕获微量碎裂),是一种接触和188金宝搏的网址无污染的分离特定单细胞或整个组织区域的方法从各种各样的组织样品。因此,您将样品与显微镜可视化,然后在视觉控制特定区域(例如单个小区,单元集)下选择进行下游分析。徕卡LMD.系统剩下的是:它将准确地解剖和收集区域,解剖物料已准备好进行下游分析,例如QPCR,微阵列,NGS,RNASEQ,Western印迹甚至克隆。

作者

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一开始

第一个激光显微解剖系统是在45年前的1976年由德国病理学家发明的[1,2].它们使用了直立的leitz- Orthoplan显微镜,并已发现重力作为收集方法。该技术提前走得太远,似乎随着时间的推移被遗忘。也许是因为没有合适的下游方法可用于分析这种微小的样品作为单个细胞。

20年前,徕卡微系统推出了徕188金宝搏的网址卡作为LMD.系统。同时,本发明了PCR方法有助于处理少量核酸作为模板。另外,通过足够的重力,汇集多重解剖到相同的收集容器中,也可以通过足够的纯原料来解决蛋白质组学或代谢组科的质谱。

徕卡as.LMD.是有意义的科学和诊断成功的基础石头。最初,激光微碎裂特别有趣的癌症研究和诊断。在视觉控制下隔离特异性微观靶的功率,以进行下游分子生物学分析,如PCR或测序是对癌症,转移甚至亚型肿瘤细胞的癌症诊断和调查非常有帮助[3].诊断明智鉴定导致肿瘤的确切底板突变至关重要,而不会受到周围健康细胞的任何偏差。这种方式可以应用特定的治疗,现在在“个性化医学”术语下众所周知[3].除了癌症旁边,任何其他疾病,受影响细胞与健康细胞形态不同的疾病都可以通过激光微粉切割在视觉控制下纯化。

LMD应用程序字段

总的来说,科学层面的激光显微解剖是区域、细胞甚至染色体特异性研究的工具,有助于建立新的知识和验证缺乏具体证据的概念。

激光显微解剖除肿瘤研究外,还征服了许多不同的应用领域。例如,神经科学得益于激光显微解剖技术,因为这项技术可以分离不同的大脑层,甚至单个神经元[4,5].该技术也有助于艾伦脑图谱验证原位杂交的发现[6].在发育研究中,激光微碎裂允许以稳定的不同发育状态分离不同的层[7].随着荧光的添加,甚至可以收集细胞周期特异性细胞,而不会污染不同细胞周期状态的细胞而不是所需的细胞[8].活细胞培养一般是一种罕见的使用,但有利于激光微粉,例如激光微粉。用于克隆[9].植物解剖也是激光显微解剖的一个领域。植物材料的重量有利于重力收集,LMD7或“激光螺丝钉”的强大激光甚至可以解剖像本地叶子这样的厚材料[10,11]

法医是激光微粉的另一种学科。最突出的例子是能够将精子细胞与受害者的罪犯和皮肤细胞分离,允许在这里带来案件在罪犯和受害者的DNA指纹中具有明确的证据。[12,13]

持续改进和创新

徕卡LMD.进化:自引言徕卡LMD.系统沿着客户的需求和期望演变,作为可靠的研究工具,以将显微镜与分子生物学链接。

亮点是:

2001年,推出徕卡ASLMD.&介绍专用荧光模块

2002年,引入了一个用于自动图像存储的数据库

2003年 - 简介特价150倍干燥目标LMD.&标本概述

2005 - 启动LMD6000,LMD.扫描阶段和模式识别模块

2007 - 绘制+扫描模式用于膜免费收集

2009 - 启动LMD6500&LMD7000

2010年 - 芯片收集设备上的简介实验室(如今:通用持有人)

2011年 - 敬业LMD.Camera CC7000.

2012年 - 高激光功率应用和激光螺钉的特殊10X目标

2013 - 48口井收集器,第三方模式识别访问,大面积点对点解剖

2014年 - 1000th徕卡LMD.系统已售出

2015 -推出LMD6和LMD7,阴影切割

2016 -数据库报告功能

2017 - 推出LMT350,用于直接收集到96孔板,特价2.5倍LMD.客观的

2018 - 最终脉冲切割模式

2019-2021 - 384孔板采集选择,形状进口和吞吐量优化

在过去的20年里,不仅越来越多的徕卡申请LMD.系统发生。该系统也不断改进,以满足用户需求和需求。与客户完全了解系统的近视步改善的这种方法,使系统提出了徕卡LMD.系统是当今雄心勃勃的工作流程的理想工具,特别是高通量应用和与AI等最新发展的结合[14].肿瘤生物标志物研究是激光显微解剖的主要目标[15].也许徕卡LMD.这些系统可以为未来的癌症疫苗做出贡献。首次发明新冠疫苗的BioNtech公司至少在传统的癌症研究领域使用了激光显微解剖系统[16]

当前状态

Falk Schlaudraff,前产品经理Leica激光微生物系统和同时经理申请管理研究显微镜和样品准备在业务部门生活中记得他在大约5年前在Mainz的Biontech总部坐在Biontech总部的Leica Lmd7000训练和培训徕卡LMD7000:“看到从Biontech这样的高级排名和熟练的研究人员应用了这项伟大的技术让我感到自豪。癌症和Covid-19的生物标志物研究方法非常相似。在过去的20年里,激光微粉的过去成功让我肯定与托马斯·康拉德周围的惠国的毕翁科学研究人员或在马蒂亚斯曼周围的Novo Nordisk基金会借助我们的徕卡改善未来的医疗保健LMD.系统。我很感激过去几年,我很高兴地旅行和与世界各地的研究人员一起讨论LMD.技术,应用程序以及建立富有成效的网络和友谊。希望全球旅行的日子在不久的将来回来。幸运的是,我们可以选择通过视频聊天的互联网连接等。然而,个人社交交互不能以数字方式替换。为了获得这种舒适的个人社交互动,激励我在世界各地的研究人员能够找到当今和未来问题的治疗,疫苗,生物标志物和解决方案,援助或我们的系统。“

参考

  1. Isenberg G,Rathke PC,Hülsmannn,Franke WW,Wohlfarth-Bottermann Ke:细胞质肌动素素在组织培养细胞中的原纤维:通过激光微束解剖分离的原纤维中ATP诱导的收缩的可视化直接证明。细胞组织res。1976年2月27日; 166(4):427-43。DOI:10.1007 / BF00225909。
  2. Isenberg G, Bielser W, Meier-Ruge W, Remy E:激光显微解剖的细胞手术:一种准备方法。acta optica sinica, 1997,10(1):19-24。doi: 10.1111 / j.1365-2818.1976.tb02419.x。
  3. Kölble K:徕卡显微解剖系统:设计与应用。英国医学杂志。2000年,78 (7):B24-5。
  4. Burbach GJ,Dehn D,Del Turco D,戴尔T:量化海马的层特异性基因表达的定量:有效地使用激光微粉切除与定量RT-PCR组合。J Neurosci方法。2003年12月30日; 131(1-2):83-91。DOI:10.1016 / s0165-0270(03)00232-2。
  5. ELSTNER M,Morris CM,Heim K,Bender A,Mehta D,Jaros E,Klopstock T,Meitinger T,Turnbull DM,Prokisch H:帕金森病和老化的多巴胺能神经元的表达分析与细胞死亡中的能量代谢的转录表达分析。Acta神经疗法醇。2011年7月122(1):75-86。DOI:10.1007 / S00401-011-0828-9。EPUB 2011年5月4日。
  6. 琼斯答:大脑的地图。Tedglobal 2011.
  7. Ikeda K, Mutoh M, Teraoka N, Nakanishi H, Wakabayashi K, Taguchi R: Min小鼠肠道息肉形成过程中血清和小肠黏膜氧化相关甘油三酯和磷脂酰胆碱的增加。中国生物医学工程学报。2011;32(1):91 - 97。doi: 10.1111 / j.1349-7006.2010.01754.x。
  8. Handschick K, Beuerlein K, Jurida L, Bartkuhn M, Müller H, Soelch J, Weber A, Dittrich-Breiholz O, Schneider H, Scharfe M, Jarek M, Stellzig J, Schmitz ML, Kracht M:周期蛋白依赖性激酶6是NF-κ b依赖性基因表达的染色质结合辅因子。中国生物医学工程学报。2014 1月23日;53(2):193-208。doi: 10.1016 / j.molcel.2013.12.002。
  9. 激光显微解剖与重力转移分离活细胞。J Biomed Opt. 2013 5月;18(5):55002。jbo.18.5.055002 doi: 10.1117/1.。
  10. Hölscherd,Shroff R,Knop K,Gottschaldt M,Crecelius A,Schneider B,Heckel DG,Schubert US,SVATOS A:在单细胞水平下的基质UV-激光解吸/电离(LDI)质谱成像:分布拟南芥次生代谢产物及金丝耳物种。工厂J. 2009 Dec; 60(5):907-18。DOI:10.1111 / J.1365-313x.2009.04012.x。
  11. Pouzoulet J,Scudiero e,Schiavon M,Rolshausen Pe:木质血管直径会影响葡萄树血管病原植物肺孢菌菌的舱室化。前植物SCI。2017年8月21日; 8:1442。DOI:10.3389 / FPLS.2017.01442。
  12. di martimino d,giuffrèg,staiti n,simone g,tuccari g,萨拉瓦l:lmd作为性攻击案例中的法医工具:LCN DNA打字,旨在识别负责任。国际国会系列,第1288卷,2006年4月,第571-573页第571-573页
  13. lmd辅助的单细胞DNA法医生物学证据分型:细胞类型和样本条件的问题。国际法医学:遗传学补充系列,第3卷,第1期,2011年12月,e47-e48页
  14. Mund A, Coscia F, Hollandi R, Kovács F, Kriston A, Brunner A- d, Bzorek M, Naimy S, Rahbek Gjerdrum LM, dyling - andersen B, Bulkescher J, Lukas C, Gnann C, Lundberg E, Horvath P, Mann M: ai驱动的Deep Visual Proteomics定义了细胞的同质性和异质性。在准备中
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