故事

20年的徕卡激光显微解剖

表型-基因型相关性是洞察的关键。因此,《从眼睛到洞察》完全适合徕卡微系统,特别是激光显微解剖。188金宝搏的网址激光显微解剖,亦称LMD或LCM (激光捕获显微解剖),是一种接触和188金宝搏的网址无污染的产品分离特定单细胞或整个组织区域的方法来自各种各样的组织样本。因此,您可以用显微镜观察样品,并在目视控制下选择特定区域(如单细胞、细胞簇)进行下游分析。徕卡LMD它将准确地解剖和收集区域,并为下游分析做好准备,如qPCR, Microarray, NGS, RNAseq, Western blot甚至克隆。

作者

主题和标签

一开始

第一个激光显微解剖系统是在45年前的1976年由德国病理学家发明的[1,2].他们使用了一种直立的Leitz-Orthoplan显微镜,并且已经发现了重力作为收集方法。这项技术远远领先于时代,似乎随着时间的推移而被遗忘。也许是因为没有合适的下游方法来分析像单细胞这样的微小样本。

20年前,徕卡微系统公司推出188金宝搏的网址了徕卡ASLMD系统。同时发明了PCR方法,有助于处理极少量的核酸作为模板。此外,简单地通过重力将多个解剖体汇集到同一个收集容器中,也可以通过充足的纯起始材料来解决蛋白质组学或代谢组学的质谱分析。

徕卡的LMD是有意义的科学和诊断成功的基石。最初,激光显微解剖在癌症研究和诊断方面特别有趣。在目视控制下分离出特异性的微观靶点,用于下游分子生物学分析,如PCR或测序,对肿瘤诊断和肿瘤、转移甚至亚肿瘤细胞的研究非常有帮助[3].在诊断方面,关键是要确定引起肿瘤的确切的底层突变,而不受周围健康细胞的任何偏见。通过这种方式,特定的治疗方法也就是现在众所周知的"个性化医疗"[3].除癌症外,在激光显微解剖可视控制下,受影响细胞与健康细胞形态不同的任何其他疾病都可以作为纯化的目标。

LMD应用领域

总的来说,科学层面的激光显微解剖是区域、细胞甚至染色体特异性研究的工具,有助于建立新的知识和验证缺乏具体证据的概念。

激光显微解剖除肿瘤研究外,还征服了许多不同的应用领域。例如,神经科学得益于激光显微解剖技术,因为这项技术可以分离不同的大脑层,甚至单个神经元[4,5].该技术也有助于艾伦脑图谱验证原位杂交的发现[6].在发育研究中,激光显微解剖可以在不同的发育状态下分离不同的层[7].随着荧光的添加,甚至细胞周期特定的细胞可以收集而不污染细胞在不同的细胞周期状态比预期[8].活细胞培养通常很少使用,但对激光显微解剖有好处,例如克隆[9].植物解剖也是激光显微解剖的一个领域。植物材料的重量有利于重力收集,LMD7或“激光螺丝钉”的强大激光甚至可以解剖像本地叶子这样的厚材料(10、11)

法医是激光显微解剖的另一门学科。最突出的例子是将罪犯的精子细胞和受害者的皮肤细胞分离出来的能力,这使得罪犯和受害者的DNA指纹有明确的证据,可以将案件绳之以法(12、13)

持续改进和创新

徕卡LMD进化:自徕卡问世以来LMD系统沿着客户的需求和期望发展,作为一个可靠的研究工具,将显微镜与分子生物学联系起来。

亮点是:

2001年,推出徕卡ASLMD&介绍专用荧光模块

2002年,引入了一个用于自动图像存储的数据库

2003 -引进专用150x干物镜LMD&标本概述

2005 -推出LMD6000LMD扫描阶段和模式识别模块

2007 -无膜收集的绘制+扫描模式

2009年-发布LMD6500和LMD7000

2010 -介绍芯片采集设备实验室(现在:万能支架)

2011 -专用LMD相机CC7000

2012年,用于高激光功率应用和激光螺丝的特殊10x物镜

2013 - 48口井收集器,第三方模式识别访问,大面积点对点解剖

2014年第1000款徕卡LMD系统销售

2015 -推出LMD6和LMD7,阴影切割

2016 -数据库报告功能

2017 -推出LMT350,直接收集到96孔板,特殊2.5xLMD客观的

2018 -最后的脉冲切割模式

2019-2021 - 384孔板采集选择,形状进口和吞吐量优化

在过去的20年里,不仅徕卡的应用越来越多LMD系统发生。该系统也不断改进,以满足用户的需要和需求。这种分步改进的方法与客户密切对话,充分了解对徕卡系统的需求LMD系统是当今雄心勃勃的工作流程的理想工具,特别是高通量应用和与AI等最新发展的结合[14].肿瘤生物标志物研究是激光显微解剖的主要目标[15].也许徕卡LMD这些系统可以为未来的癌症疫苗做出贡献。首次发明新冠疫苗的BioNtech公司至少在传统的癌症研究领域使用了激光显微解剖系统[16]

当前状态

Falk Schlaudraff博士是徕卡激光显微解剖系统的前产品经理,同时也是生命科学业务单元应用管理研究显微镜和样品制备经理。他记得大约5年前,他在美因茨的生物技术总部亲自安装和培训徕卡LMD7000:“看到这一伟大的技术被如此高排名和技术熟练的生物技术研究人员应用,我感到自豪。癌症和COVID-19的生物标志物研究方法非常相似。激光显微解剖在过去20年的成功使我确信,与托马斯·康拉德周围的WHIRC生物技术研究人员或诺和诺德基金会周围的马蒂亚斯·曼一起,将通过我们的徕卡帮助改善未来的医疗保健LMD系统。我很感激在过去的几年里,我有幸旅行并与世界各地的研究人员见面,并讨论LMD技术,应用,以及建立卓有成效的网络和友谊。希望在不久的将来,全球旅行的日子再次到来。幸运的是,我们可以选择通过互联网进行视频聊天等。然而,个人的社会互动不能被数字化的方式所取代。为了从个人社会互动中获得这种安慰,我鼓励世界各地的研究人员利用我们的援助或系统,为今天和未来的问题找到治疗方法、疫苗、生物标记和解决方案。”

参考文献

  1. Isenberg G, Rathke PC, Hülsmann N, Franke WW, Wohlfarth-Bottermann KE:组织培养细胞的胞浆肌动球蛋白原纤维:通过可视化atp诱导的激光微束分离的原纤维收缩的直接证据。acta physica sinica (physica sinica), 2003,22(4):427- 434。doi: 10.1007 / BF00225909。
  2. Isenberg G, Bielser W, Meier-Ruge W, Remy E:激光显微解剖的细胞手术:一种准备方法。acta optica sinica, 1997,10(1):19-24。doi: 10.1111 / j.1365-2818.1976.tb02419.x。
  3. Kölble K:徕卡显微解剖系统:设计与应用。英国医学杂志。2000年,78 (7):B24-5。
  4. Burbach GJ, Dehn D, Del Turco D, Deller T:海马层特异性基因表达的定量:激光显微解剖结合定量RT-PCR的有效使用。《神经科学方法》2003年12月30日;131(1-2):83-91。doi: 10.1016 / s0165 - 0270(03) 00232 - 2。
  5. Elstner M, Morris CM, Heim K, Bender A, Mehta D, Jaros E, Klopstock T, Meitinger T, Turnbull DM, Prokisch H:帕金森病和衰老中多巴胺能神经元的表达分析将能量代谢转录失调与细胞死亡联系起来。神经病理学杂志。2011 7月;122(1):75-86。doi: 10.1007 / s00401 - 011 - 0828 - 9。2011年5月4日。
  6. 琼斯:一张大脑的地图。TEDGlobal 2011
  7. Ikeda K, Mutoh M, Teraoka N, Nakanishi H, Wakabayashi K, Taguchi R: Min小鼠肠道息肉形成过程中血清和小肠黏膜氧化相关甘油三酯和磷脂酰胆碱的增加。中国生物医学工程学报。2011;32(1):91 - 97。doi: 10.1111 / j.1349-7006.2010.01754.x。
  8. Handschick K, Beuerlein K, Jurida L, Bartkuhn M, Müller H, Soelch J, Weber A, Dittrich-Breiholz O, Schneider H, Scharfe M, Jarek M, Stellzig J, Schmitz ML, Kracht M:周期蛋白依赖性激酶6是NF-κ b依赖性基因表达的染色质结合辅因子。中国生物医学工程学报。2014 1月23日;53(2):193-208。doi: 10.1016 / j.molcel.2013.12.002。
  9. 激光显微解剖与重力转移分离活细胞。J Biomed Opt. 2013 5月;18(5):55002。jbo.18.5.055002 doi: 10.1117/1.。
  10. Hölscher D, Shroff R, Knop K, Gottschaldt M, Crecelius A, Schneider B, Heckel DG, Schubert US, Svatos A:拟南芥(Arabidopsis thaliana)和金丝桃(Hypericum)次生代谢产物在单细胞水平上的无基质紫外激光解吸/电离(LDI)质谱成像。植物学报2009年12月;60(5):907-18。doi: 10.1111 / j.1365 - 313 x.2009.04012.x。
  11. acta optica neica (acta optica neica (acta optica neica) (acta optica neica (acta optica) (acta optica) (acta optica) (acta optica) (acta optica) (acta optica) (acta optica));植物学报2017 8月21日;8:1442。doi: 10.3389 / fpls.2017.01442。
  12. Di Martino D, Giuffrè G, Staiti N, Simone G, Tuccari G, Saravo L: LMD作为性侵犯案件的法医工具:LCN DNA类型识别责任人。国际会议系列,第1288卷,2006年4月,571-573页
  13. lmd辅助的单细胞DNA法医生物学证据分型:细胞类型和样本条件的问题。国际法医学:遗传学补充系列,第3卷,第1期,2011年12月,e47-e48页
  14. Mund A, Coscia F, Hollandi R, Kovács F, Kriston A, Brunner A- d, Bzorek M, Naimy S, Rahbek Gjerdrum LM, dyling - andersen B, Bulkescher J, Lukas C, Gnann C, Lundberg E, Horvath P, Mann M: ai驱动的Deep Visual Proteomics定义了细胞的同质性和异质性。在准备中
  15. 贝特曼NW,腾PN,希望E罩提单,奥利弗·J, Ao W,周,王G, Tommarello D,威尔逊K, Litzy T,康拉德KA,汉密尔顿CA,达西公里,卡萨布兰卡Y,麦克斯韦GL, Bae-Jump V,康拉德TP:木星microtubule-associated同族体1 (JPT1):一个预测,在子宫内膜癌药效学二甲双胍反应的生物标记。癌症医学2020年2月;9(3):1092-1103。doi: 10.1002 / cam4.2729。
  16. Hartmann K, Schlombs K, Laible M, Gürtler C, Schmidt M, Sahin U, Lehr HA: RT-qPCR检测乳腺癌生物标志物的稳稳性:肿瘤细胞含量、DCIS和非肿瘤性乳腺组织的影响。2018年10月20日;13(1):83。doi: 10.1186 / s13000 - 018 - 0760 - 6。

想知道更多吗?

和我们的专家谈谈。我们很高兴回答您的所有问题和关切。

188金宝搏的网址联系我们

你更喜欢私人咨询吗?

  • 188金宝搏的网址徕卡微系统有限公司
    很遗憾,1700巷
    布法罗格罗夫伊尔60089 美国
    办公室电话:+1 800 248 0123
    188bet官网1服务电话:1 800 248 0223
    传真:+ 1 847-236-3009

你可以在这里找到更详细的本地联系人列表。188金宝搏的网址