郑鹏,Bertolet G,陈勇,黄松,刘丹:
在玻璃支撑的平面脂质双分子层上的自然杀伤细胞免疫突触的超分辨率成像
J. Vis Exp. 96: e52502 (2015);doi: 10.3791/52502
玻璃支撑的平面脂质双分子层体系已被广泛应用于多种学科。该技术最有用的应用之一是在免疫突触形成的研究中,由于玻璃支撑的平面脂质双分子层能够在形成水平界面的同时模拟靶细胞的表面。最近超分辨率成像技术的进步进一步使科学家们能够更好地观察突触结构的细节。在这项研究中,其中一项先进的技术,刺激排放耗竭(发生的),用于研究自然杀伤细胞(NK)在脂质双分子层上的突触结构。本文提供了一个易于遵循的详细方案:如何制备用于合成玻璃支撑双分子层的原始合成磷脂;如何确定特定浓度的蛋白质占据双分子层附着位点的密度;如何构建含抗NK细胞活化受体CD16抗体的脂质双分子层;最后,如何在这个双分子层上成像人类NK细胞发生的超分辨率显微镜检查,重点观察NK突触穿孔素阳性裂解颗粒和丝状肌动蛋白的分布。因此,将玻璃支撑的平面脂质双分子层体系与发生的我们展示了该联合技术的可行性和应用,以及NK免疫突触的细胞内结构的超分辨率。
J. Vis Exp. 96: e52502 (2015);doi: 10.3791/52502
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